摘要：对生态功能性建筑材料发展的必要性及特点和类型进行了分析,总结了生态功能性建筑材料在建筑设计中的应用,提出了生态功能性建筑材料在研发和推广应用中存在的问题及建议。

摘要：临床科研方法的选择临床科研可分为回顾性和前瞻性研究.回顾性研究是临床总结经验的重要方法之一,其论文长期占所有文献相当高的比例,今后仍有存在的必要.回顾性研究虽然省事、省力,但事先没有进行严格的设计,资料收集的完整性和准确性较差,结论难免受人为主观因素和非试验因素干扰,容易产生系统误差(error)和偏倚(bias),故存在严重的缺陷.由于证据医学越来越受到重视,随机对照试验(randomized control trial,RCT)的报道日见增多.

摘要：目的探讨小分子干扰RNA(SiRNA)对幽门螺旋杆菌CagA基因表达的影响。方法设计5条不同序列的针对CagA基因的的小分子干扰RNA和一条非特异性的小分子干扰RNA,采用电穿孔法转入幽门螺杆菌,以半定量RT-PCR法检测穿孔前和穿孔后1h、6h、12h、24h、48h细菌CagAmRNA的表达并用Westernblot检测CagA蛋白表达。结果电穿孔后其中1条小分子干扰RNA-SiRNAⅢ作用的CagA-mRNA显著地呈一过性表达下降,6h达最低值,1h、6h、12h、24h表达水平分别为电穿孔前的36.7%、31.3%、43.5%、76.8%(P<0.05),抑制率为68.7%,Westernblot显示12h带最弱;而另1条小分子干扰RNA-SiRNAⅤ作用较弱,抑制率为23.1%。其余3条及非特异性的小分子干扰RNA未见变化。结论SiRNA可特异性抑制幽门螺杆菌CagA基因表达。

摘要：目的:利用小分子干扰RNA(siRNA)探讨CagA在幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8中的作用。方法:设计5条siRNA,采用电穿孔法转入CagA+幽门螺杆菌NCTC11637,与胃黏膜上皮细胞共培养后测定IL-8水平,并以RT-PCR、Western blotting法检测穿孔前、后不同时点细菌的CagA表达。采用CagA-株NCTC11639作对照。结果:CagA+NCTC11637诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8水平明显高于CagA-NCTC11639[(1200·00±32·51)ng/Lvs(100·00±8·58)ng/L](P<0·01)。siRNAⅢ转化的幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8水平显著低于转化前[(400·00±17·35)ng/Lvs(1200·00±32·51)ng/L](P<0·05);siRNAⅢ转化的幽门螺杆菌CagA mRNA水平显著低于转化前,穿孔后6h mRNA水平最低为31·3%(0·270/0·861),抑制率为68·7%。Western blotting显示siRNAⅢ组CagA蛋白水平低于穿孔前(P<0·01);其余4条siRNA未见显著变化。结论:CagA在幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞分泌IL-8中起重要作用,小分子干扰RNA可能通过抑制CagA基因表达而减少幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞IL-8的分泌。

摘要：目的　构建针对人端粒酶催化亚单位 (humantelomerasecatalyticsubunit,hTERT)基因的小分子干扰RNA(smallinterferingRNA ,siRNA)表达载体pU6 hTERT siRNAs,观察其对胃癌SGC790 1细胞hTERT基因的特异性抑制作用。方法　采用报告基因质粒pCX GFP( 5 5 10bp)和含有鼠U6启动子pU6 ( 330 0bp)质粒 ,设计合成针对绿色荧光蛋白 (GFP)基因的发夹RNA(shRNA)序列 ,构建SHi pU6 GFP质粒。应用LipofectamineTM2 0 0 0将pCX GFP质粒和SHi pU6 GFP质粒转染K5 6 2细胞、SGC790 1细胞 ,并用荧光显微镜观察转染效果。设计合成针对hTERT的siRNAs ,构建重组pU6 hTERT siRNAs质粒。LipofectamineTM2 0 0 0介导pU6 hTERT siRNAs质粒转染SGC790 1细胞。分别应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和荧光定量聚合酶链式反应 (FQ PCR)定性和定量检测hTERT基因表达情况。结果　质粒pU6和SHi pU6 GFP经EcoRⅤ和XbaⅠ酶切电泳后 ,前者出现 330 0bp和约 30 0bp条带 ,而后者出现 330 0bp和约 35 0bp条带 ,与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHi pU6 GFP质粒。K5 6 2细胞和SGC790 1细胞中分别观察到转染pCX GFP质粒和SHi pU6 GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。定性。

摘要：目的构建针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA表达载体(SHipU6GFP),观察SHipU6GFP对结肠癌LoVo细胞的GFP特异性抑制作用。方法设计合成针对绿色荧光蛋白GFP基因的发夹RNA(shRNA)序列,构建SHipU6GFP质粒。采用报告基因质粒pCXGFP(5510bp)和含有鼠U6启动子pU6(3.3kb)质粒,应用LipofectamineTM2000将pCXGFP质粒和SHipU6GFP质粒转染K562细胞和LoVo细胞。荧光显微镜观察转染效果和不同时间的转染效率。结果质粒pU6和SHipU6GFP经EcoRⅤ和XbaⅠ酶切电泳后,前者出现3.3kb和约300bp条带,而后者出现3.3kb和约350bp条带,与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHipU6GFP质粒。K562细胞和LoVo细胞中分别观察到转染pCXEGFP质粒和SHipU6GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。结论结肠癌LoVo细胞存在RNA干扰现象,可以进行相关RNA干扰抑制实验。

摘要：目的探讨靶向环氧合酶-2(COX-2)的RNA干扰(RNAi)对胃癌SGC-7901细胞增生和凋亡的影响。方法设计并合成6条COX-2小分子干扰RNA(siRNA)和1条阴性对照siR- NA,用TOPtranfection介导转染胃癌SGC7901细胞,荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测胃癌SGC7901细胞中COX-2基因和蛋白的表达,用流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡情况,并与对照组进行比较。结果TOPtranfection能够有效介导COX-2 siRNA和阴性对照siRNA转染胃癌SGC7901细胞；TOPtranfection介导的COX-2 siRNA有效抑制了胃癌细胞COX-2 mRNA表达,与对照组相比抑制效率90．0%以上,最高达98．3%,同时抑制胃癌SGC7901细胞COX-2蛋白表达,与阴性对照组及对照组相比,COX-2蛋白抑制率分别为72．0%和72．1%。试验组、阴性对照组及对照组胃癌细胞凋亡率分别为：22．28±3．62、1．23±0．27和1．03±0．14。试验组与阴性对照组(t= 14．214,P＜0．01)和对照组(t=14．378,P＜0．01)比较,差异均具有统计学意义,阴性对照组与对照组比较(t=1．635,P＞0．05)差异无统计学意义。结论靶向COX2的RNA干扰能有效抑制胃癌细胞中COX-2基因和蛋白的表达,同时能明显增加胃癌细胞凋亡、抑制胃癌细胞增生。

摘要：目的:观察针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA(smallhairpinRNA,shRNA)表达载体(SHipU6GFP)对SGC7901胃癌细胞中GFP的抑制作用。方法:设计针对GFP基因的shRNA序列,构建SHipU6GFP质粒。采用质粒pCXGFP(5510bp)和含有鼠U6启动子pU6(3.3kb)质粒,应用LipofectamineTM2000将pCXGFP质粒和SHipU6GFP质粒转染SGC7901细胞。荧光显微镜观察转染效果和不同时间的转染效率。结果:质粒SHipU6GFP经酶切电泳后,出现3.3kb和约350bp条带,与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHipU6GFP质粒。SGC7901细胞中观察到转染pCXEGFP质粒和SHipU6GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。结论:shRNA可以有效地抑制SGC7901细胞中GFP基因的表达。

摘要：目的 探讨腮腺癌术后高危复发区用何种照射方法可以更有效的使靶区剂量均匀及更好的保护危及器官.方法 对8例腮腺癌术后患者设计治疗计划,处方剂量为95%计划靶区（PTV）60 Gy/30次.对常规放疗、二维适形放疗（2D-CRT）、三维适形放疗（3D-CRT）和调强放疗（IMRT）等放射治疗技术的腮腺癌术后靶区进行放疗计划设计,分析比较各种治疗计划靶区适形度和在保护危及器官等方面的优劣.结果 在2D-CRT时,以计算点深度取3.5 cm,电子线能量采取12 MeV及X射线/电子射线（X/E）剂量比为1∶2时靶区的适形度和均匀度较好,危及器官的受量较低.与2D-CRT比较,常规放疗照射野能够较好地包括CT断层图像上勾画的靶区.与2D-CRT及3D-CRT相比,IMRT计划有最好的靶区适形度及均匀度,同时对危及器官有较好的保护作用.结论 X射线与电子线混合线束照射时,剂量计算点深度取3.5 cm左右、电子线能量采取12 MeV及X/E剂量比为1∶2时,靶区的适形度和均匀度较好,对正常组织的保护较好,但具体患者最好用计划系统来选择以上指标.常规放疗按解剖标志确定的照射野能够较好地包括三维靶区.IMRT计划的靶区适形度及均匀度最好,并且危及器官受量较低,在腮腺癌术后放射治疗中IMRT技术是值得推广并普及的放射治疗技术.