摘要：本试验以载牛乳铁蛋白肽-壳聚糖纳米粒(BLfcin-NPs)为添加剂,研究其对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)氧化损伤的保护作用。采用单因素完全随机试验设计,以BMECs为模型,采用不同浓度[0(对照组)、100、200、400、600、800、1000μmol/L]H_(2)O_(2)对BMECs分别处理0、2、4、6、8、12 h,确定构建BMECs氧化损伤模型的最佳H_(2)O_(2)浓度及作用时间。以500μg/mL的BLfcin-NPs预处理BMECs 12 h后用400μmol/L的H_(2)O_(2)处理6 h,检测BMECs内线粒体膜电位(MMP)、抗氧化指标以及抗氧化与凋亡相关基因mRNA相对表达量。结果显示:1)与0μmol/L H_(2)O_(2)处理的对照组相比,不同浓度H_(2)O_(2)作用6 h后显著或极显著降低BMECs活力(P<0.05),并对细胞产生毒性,并且在400μmol/L的H_(2)O_(2)作用下BMECs晚期凋亡率极显著升高(P<0.01)。400、600、800μmol/L的H_(2)O_(2)作用6 h后,BMECs内ROS含量增加,且呈剂量依赖性。2)与未进行BLfcin-NPs预处理的H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤BMECs细胞相比,BLfcin-NPs预处理显著提高了BMECs内线粒体膜电位下降比例(P<0.05),显著升高了谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),并显著降低了丙二醛(MDA)含量(P<0.05);此外,BLfcin-NPs预处理还显著上调了BMECs内抗氧化相关基因核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)的mRNA相对表达量(P<0.05),同时显著上调了凋亡相关基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的mRNA相对表达量(P<0.05),并显著下调了Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,BLfcin-NPs通过调控Nrf2信号通路中关键基因的表达缓解H_(2)O_(2)诱导的BMECs氧化损伤。

摘要：本试验旨在研究青蒿素对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂合成相关基因表达的影响。采用单因素完全随机试验设计,添加青蒿素浓度分别为0(对照)、10、20、40、60、80、100μmol/L的培养基与BMECs共培养1、3、6、9、12和24 h,每组6个重复。结果表明:与对照组相比,作用12 h后,青蒿素浓度为20、40、60μmol/L极显著提高了BMECs的相对活性(P<0.01),显著提高了脂质的聚集和细胞内甘油三酯(TG)的含量(P<0.05);实时荧光定量PCR结果表明,青蒿素能显著提高乳脂合成相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、胆固醇调节元件结合蛋白1-c(SREBP1-c)、脂肪酸合成酶(FASN)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)基因相对表达量(P<0.05);青蒿素也可极显著提高丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)基因相对表达量(P<0.01);Western-blot结果表明,40μmol/L的青蒿素显著上调了腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、mTOR、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、PPARγ、SREBP1-c蛋白的表达(P<0.05)。综上所述,40μmol/L的青蒿素提高BMECs乳脂合成的效果较好,青蒿素通过调控AMPK-mTOR信号通路中关键基因的转录从而促进BMECs中乳脂肪的合成。

摘要：本试验通过研究不同泌乳水平奶牛在瘤胃发酵和血清代谢上的差异,从消化和代谢的角度解释不同泌乳水平奶牛的泌乳合成机制差异,为提高奶牛的生产性能提供理论依据。试验采用随机区组设计,选择24头体况良好、体重[(648.50±68.65)kg]、胎次[(2.64±0.70)胎]相近的泌乳中期[(182.0±31.5)d]荷斯坦奶牛,按产奶量分为高产组[(41.7±4.8)kg/d]和低产组[(24.1±3.9)kg/d],各12头,在相同的饲养管理条件下饲喂相同的全混合日粮。分别用乳成分分析仪、酶免法、比色法和气相色谱法对乳成分、血清代谢指标及瘤胃发酵参数进行测定。结果表明:1)高产组奶牛乳成分中乳蛋白、乳脂和乳糖含量极显著高于低产组(P<0.01),乳总固形物含量显著高于低产组(P<0.05),而乳蛋白率极显著低于低产组(P<0.01);2)高产组奶牛瘤胃中总挥发性脂肪酸、丙酸及丁酸含量极显著高于低产组(P<0.01),乙酸含量显著高于低产组(P<0.05);3)高产组奶牛血清能量代谢指标葡萄糖(GLU)和甘油三酯(TG)含量极显著低于低产组(P<0.01),非酯化脂肪酸(NEFA)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著低于低产组(P<0.05),β-羟丁酸(BHBA)含量极显著高于低产组(P<0.01);抗氧化指标血清丙二醛(MDA)含量显著高于低产组(P<0.05),总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性显著低于低产组(P<0.05);免疫指标血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量极显著低于低产组(P<0.01),免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-6(IL-6)含量显著低于低产组(P<0.05),而免疫球蛋白M(IgM)含量显著高于低产组(P<0.05)。综上所述,高、低产奶牛在瘤胃发酵及血清代谢指标方面存在显著性差异。