摘要：背景:糖皮质激素长期大剂量应用可导致骨质丢失甚至股骨头坏死,是药源性骨损害的原因之一,对其干预研究具有实际意义。目的:探讨长期超生理剂量应用糖皮质激素对大鼠所致的骨质疏松症特点,同时观察中药复方丹参制剂的干预效应。设计:以实验动物为研究对象的随机对照实验研究。单位:一所医学院的实验动物中心、中心实验室和药理研究室。材料:实验于2002/2003在广东医学院实验动物中心、药理研究室和中心实验室完成。选用40只SD大鼠。方法:SD大鼠予泼尼松按2.7mg/kg每天灌胃,连续12周,同时予复方丹参制剂(丹参、黄芪、白术和淫羊藿)按2.5g/(kg·d),5.0g/(kg·d)和10.0g/(kg·d)进行治疗。实验结束后通过测量不脱钙胫骨上段的骨生长的静态和动态指标、尺骨中羟脯胺酸、钙磷含量以及股骨长度来观察糖皮质激素长期超生理剂量应用后对大鼠骨代谢的影响,并观察复方丹参制剂对其的防治作用。主要观察指标:主要结局:复方丹参制剂对泼尼松大鼠骨形态计量学静态、动态参数指标的影响;次要结局:复方丹参制剂对泼尼松大鼠骨生化指标及股骨物理指标影响的比较。结果:泼尼松大鼠质量明显下降P<0.01),骨形态学指标显示骨小梁(数量犤(1.98±0.20)/mm犦和骨小梁面积百分数(8.83%±0.98%)显著减少,骨表面骨形成率。

摘要：背景:有报道雌激素和孕激素联合应用对防治绝经后骨质疏松症有协同作用,且副作用较小。目的:观察炔诺酮和炔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨量的影响。设计:随机对照验证性实验观察。单位:广东医学院药理教研室。对象:清洁级4个半月龄未交配的雌性SD大鼠24只,体质量(230±15)g。方法:实验于2002-05/11在广东医学院药理教研究空完成。大鼠随机分成3组:假手术组,去卵巢组,复方炔诺酮组,每组8只,前2组采用体积分数为0.056的乙醇溶液5mL/(kg·d)灌胃,复方炔诺酮组采用炔诺酮60μg/(kg·d)和炔雌醇3.5μg/(kg·d)灌胃(实验用药剂量参照人的用药20～35μg雌激素+孕激素)。所有动物给药时间为90d。给药结束后取胫骨标本,采用全自动图像分析系统对胫骨近端次级骨小梁形成区进行破骨细胞和有关动静态参数的测量;另取肱骨标本用电感偶合等离子体直读光谱仪测定钙含量和测定羟脯氨酸含量。同时测定尿中的钙和羟脯氨酸的含量。主要观察指标:①各组大鼠骨小梁面积、骨小梁厚度、骨小梁数目、骨小梁分离度、破骨细胞周长的静态参数变化。荧光周长百分数、矿化沉积率、骨形成率动态参数变化。②血清碱性磷酸酶、骨和尿中钙含量和羟脯氨酸含量变化。结果:24只大鼠均进入结果分析。①去卵巢大鼠与假手术组大鼠相比,骨小梁面积百分数下降,骨小梁数目降低和骨小梁分离度增加,伴随明显的破骨细胞周长增加(P<0.01);骨形成指标明显增加:荧光周长百分数和矿化沉积率增加(P<0.05),骨形成率(BFR/BV)明显增加(P<0.01)。②复方炔诺酮组与去卵巢组比较,骨量和骨小梁数目增加,骨小梁面积增加82%和骨小梁数目增加83%(P<0.05),骨小梁分离度降低51%(P<0.05);破骨细胞周长降低52.5%(P<0.01);同时骨有机质含量增加和尿羟脯氨酸排出量减少(P<0.05)。结论:炔诺酮和炔雌醇联合应用可防治去卵巢大鼠骨质疏松,增加骨量和骨有机质含量,且不明显抑制骨形成。实验提供的药物剂量参照人的用量,20～35μg雌激素结合一种孕激素,其效果良好时即可提供一种最好的骨保护作用。

摘要：背景:男性骨质疏松的预防越来越受到人们的重视。目的:建立去睾丸大鼠骨质疏松模型,通过骨形态计量学方法观察羟乙膦酸钠对不同部位骨骼的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2002-10/2006-09在广东医学院动物实验中心及骨生物学研究室完成。材料:3.5月龄SD雄性大鼠40只,体质量(299±22)g。羟乙膦酸钠,成都化学制药厂生产,批号:970101。甲基睾丸酮片,广州侨光制药厂,批号:990701。方法:将大鼠随机分成基础对照组、假手术组、去睾丸组、去睾丸加甲基睾丸酮组和去睾丸加羟乙膦酸钠组,每组8只。基础对照组在实验开始时处死。假手术组切开皮肤,暴露睾丸但不切除。其余大鼠按文献报道方法切除睾丸。假手术组和去睾丸组给予生理盐水,睾丸酮组给予甲基睾丸酮片1.8mg/(kg?d),羟乙膦酸钠组给予羟乙膦酸钠36mg/(kg?d),大鼠每只按5mL/kg灌胃给药,连续给药90d。主要观察指标:测量胫骨上段、第5腰椎松质骨和胫骨中段皮质骨骨组织形态计量学参数。结果:与假手术组比较,去睾丸组大鼠胫骨上段和腰椎松质骨骨小梁面积百分率、骨小梁数量或骨小梁厚度减少(P<0.05和0.01),而骨小梁分离度、标记周长百分数、骨形成率、每毫米破骨细胞数均增加(P<0.05和0.01)。与去睾丸组比较,羟乙膦酸钠和睾丸酮组大鼠胫骨上段和腰椎松质骨骨量均增加,而骨形成和骨吸收的参数均降低,羟乙膦酸钠组与睾丸酮组比较差异无显著性意义。各组大鼠胫骨中段皮质骨形态计量学参数均无明显变化。结论:羟乙膦酸钠能预防鼠造成的胫骨上段和腰椎松质骨丢失,但对胫骨中段皮质骨无明显影响。

摘要：背景:中药治疗骨折既经济、而且疗效比较确切,因此越来越受到重视与关注。目的:监测家兔骨折骨组织形态计量学指标,评估复方丹参促进骨折愈合的作用。设计、时间及地点:完全随机分组对照动物实验,2005-03/12在广东医学院动物实验中心及药理教研室完成。材料:普通级雄性新西兰兔36只,体质量(2.1±0.2)kg,用于制作桡骨骨折缺损动物模型。大连美罗中药厂生产伤科接骨片,批号为200405209。自制复方丹参,主要成分为丹参、淫羊藿、黄芪、白术。方法:将动物模型随机分成模型组、复方丹参组、伤科接骨片组。模型组给予普通饲料,复方丹参组给予含复方丹参13g/kg的特殊饲料,伤科接骨片组给予含伤科接骨片17g/kg的特殊饲料。主要观察指标:造模成功后21d和35d各组模型桡骨骨痂骨形态计量学参数分析。结果:模型兔36只进入结果分析。骨折后21d复方丹参组骨小梁面积百分数和骨小梁厚度均比模型组增加(P0.05)。复方丹参组与伤科接骨片组骨组织形态计量学参数比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:复方丹参促进家兔骨折中期骨愈合,效果与伤科接骨片相当。

摘要：背景:研究表明骨质疏松症可能是间充质干细胞分化失衡后过多地向脂肪细胞分化所致。因此,探讨骨髓间充质干细胞成脂分化的影响因素对骨质疏松症防治具有重要意义。目的:分析骨髓间充质干细胞在体外定向分化为脂肪细胞的适宜诱导条件。设计、时间及地点:以细胞为对象,重复观察测量实验,于2007-10/2008-07在广东医学院药理教研室完成。材料:1月龄SD雄性大鼠由广东医学院实验动物中心提供。方法:无菌条件下分离大鼠股骨,密度梯度离心法与贴壁培养法相结合分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养。第3代骨髓间充质干细胞完全汇合后,利用内含0.1mmoL/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、0.1mmoL/L吲哚美辛、1μmoL/L地塞米松、不同浓度胰岛素及胎牛血清的DMEM定向诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。主要观察指标:①倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态特征。②油红O染色检测骨髓间充质干细胞成脂肪分化情况。结果:①倒置显微镜下观察,传3代后可获得均一性较高的骨髓间充质干细胞。②体积分数为0.05和0.1胎牛血清均能获得较好的成脂分化效果,胎牛血清体积分数增至0.2反而抑制骨髓间充质干细胞成脂分化(P0.05)④低糖(含葡萄糖1g/L)和高糖(含葡萄糖4.5g/L)DMEM对骨髓间充质干细胞的成脂分化无影响(P>0.05)。结论:骨髓间充质干细胞经内含0.1mmoL/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、10mg/L胰岛素、0.1mmoL/L吲哚美辛、1μmoL/L地塞米松、体积分数为0.1胎牛血清的DMEM分化诱导液定向诱导可获得较好的成脂分化效果。