T=题名(书名、题名),A=作者(责任者),K=主题词,P=出版物名称,PU=出版社名称,O=机构(作者单位、学位授予单位、专利申请人),L=中图分类号,C=学科分类号,U=全部字段,Y=年(出版发行年、学位年度、标准发布年)
AND代表“并且”;OR代表“或者”;NOT代表“不包含”;(注意必须大写,运算符两边需空一格)
范例一:(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二:P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016
摘要:目的构建卷曲蛋白跨膜受体7(FZD7)基因启动子,并分析其肝癌特异性转录调控活性。方法构建FZD7启动子及FZD7启动子变异体(MutFZD7),并设计合成荧光报告载体pFZD7-绿色荧光蛋白(GFP)、MutpFZD7-GFP。将各重组质粒载体转染至肝癌细胞HepG2、SMMC7721及正常肝细胞1.02中,用荧光显微镜和流式细胞仪检测GFP的表达。在裸鼠肝癌移植瘤模型瘤体内注射各重组质粒后,制备肿瘤组织冰冻切片并在荧光显微镜下观察GFP表达。结果转染pFZD7-GFP的肝癌细胞HepG2和SMMC7721中均有高强度荧光,且GFP表达率分别为(45.1±3.1)%和(25.3±2.5)%,显著高于L02细胞的GFP表达率[(0.4±0.3)%,P〈0.05];而转染MutpFZD7-GFP的HepG2、SMMC7721和L02细胞中荧光强度明显较弱,且GFP表达率分别为(21.5±2.7)%、(12.3±2.1)%和(0.2±0.1)%,均显著低于转染pFZD7-GFP的各对应组(P〈0.05);对照组中,转染对照质粒pFZD7-Luc的肝癌细胞及L02细胞中未检测到GFP的表达,而转染对照质粒pEGFP-N1的各细胞株中均有大量细胞表达GFP。在裸鼠肝癌移植瘤中有相似的结果。结论FZD7启动子具有高度的肝癌特异性活性,T细胞因子/淋巴增强因子(TCF/LEF)转录因子结合位点在其转录调控中发挥关键作用。
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