摘要：目的:采用新型TaqMan探针建立检测钩端螺旋体的实时荧光定量PCR。方法:根据钩端螺旋体16s rDNA设计的一对引物及探针,以钩体标准菌株的核酸为模板,在荧光定量PCR检测仪(ABI 7500)建立实时荧光定量PCR。结果:建立的定量标准曲线的循环CT值与模板拷贝数呈现良好的线性关系(r=0.998),与普通PCR相比,荧光PCR的灵敏度是其1000倍,检测其他细菌DNA,未检测到信号。结论:本研究中检测钩端螺旋体的实时荧光定量PCR具有高度的特异性和敏感性,特别适合检测样本中微量的钩端螺旋体。

摘要：目的建立一种敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于检测临床标本中的恙虫病东方体。方法根据恙虫病东方体GroEL蛋白基因序列设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测方法。并从灵敏度、特异度、重复性及临床标本的检测能力等方面对本方法进行综合评价。结果建立的实时荧光定量PCR方法具有良好的特异性,可检测出恙虫病东方体Gilliam、Karp、Kato和Kawasaki株。建立的标准曲线循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈现良好的线性关系(r=0.99),灵敏度分析显示样品最低检出浓度为21.8拷贝/μL。批内及批间重复性实验变异系数均小于1.5%,显示本方法具有良好的重复性。对本实验室保存的82份临床标本进行检测,并与常规巢式PCR方法比较,本方法检测出26份阳性标本中的25份,检出率为96.15%。结论本研究建立的实时荧光定量PCR方法具有较高的敏感性、特异性和稳定性,可用于临床病人及暴发疫情的实验室快速检测。

摘要：目的 分析2013年靖江市1起恙虫病暴发疫情的流行病学特征,评估经济损失。方法 在流行季节开展应急监测和主动搜索以发现病例;病例诊断采用RT-PCR法检测恙虫病东方体特异核酸或酶联免疫法（ELISA）检测恙虫病IgM和IgG抗体。采用自行设计的问卷对确诊病例进行调查,内容包括基本情况、诊治过程、诊疗费用及相关经济损失,计算患病后直接、间接、无形经济损失和总经济损失。结果 这起恙虫病疫情累计报告确诊病例271例,无死亡病例,发病率39.6/10万。发病时间为10月18日-12月11日,流行高峰期为11月上旬（占48.3%）;14个乡镇有病例报告,发病率为4.1/10万~220.5/10万。男女发病率比为1∶1.63,差异有统计学意义（P〈0.01）。病例多为50~69岁（占58.6%）,职业以农民为主（占86.9%）。评估这起恙虫病暴发总经济负担为1 958 885元,人均7 228元,其中直接经济负担998 093元,人均3 683元;间接经济负担331 530万元,人均1 542元;无形经济负担629 262元,人均2 322元。结论 靖江市恙虫病暴发属于南方模式,与秋天水稻收割有关;发病后首诊未能及时确诊和治疗是经济负担增加的重要原因,以较高的直接经济负担为主。