摘要：目的　探讨环氧合酶 (COX) 2反义寡核苷酸 (ODNs)对胰腺癌PC 3细胞株COX 2mRNA和蛋白表达的影响 ,并进一步阐明COX 2反义ODNs基因治疗胰腺癌的可行性。方法　设计和合成COX 2反义ODNs,体外转染胰腺癌PC 3细胞 ,然后通过荧光显微镜、RT PCR及Westernblotting证实转染效果。结果　转染COX 2反义ODNs后 ,PC 3细胞COX 2mRNA和蛋白表达均下降 ,且体现出一定的剂量和时间依赖性关系。结论　COX 2反义ODNs转染胰腺癌PC 3细胞株后 ,可下调细胞中COX 2mRNA和蛋白表达 ,COX 2反义ODNs有可能达到胰腺癌基因治疗的效果。

摘要：目的　研究环氧合酶 2反义寡核苷酸 (COX 2AS ODN)对胰腺癌新生血管生成的抑制作用 ,探讨前列腺素E2 (PGE2 )在胰腺癌新生血管生成中的调节作用。方法　设计、合成特异性靶向COX 2AS ODN。人胰腺癌PC 3细胞进行体外培养 ,转染COX 2AS ODN后 0、12、2 4、4 0、和 72h以荧光显微镜观察细胞情况。第二批PC 3细胞用于研究量 效关系 ,分为 5组 :对照组、Lipo组 (接种Lopofectin脂质体 )、C1组 ( 1μgCOX 2AS ODN +Lipo/孔 )、C2组 ( 2 μgCOX 2AS ODN +Lipo/孔 )、和C3组 ( 3μgCOX 2AS ODN +Lipo/孔 )。第三批PC 3细胞用于研究时 效关系 ,接种 3μgCOX 2AS ODN +Lipo/孔后观察 0、12、2 4、4 8、和 72h。用RT PCR观察COX 2mRNA的表达。以Western印迹观察分别加入 3μg和 9μgCOX 2AS ODN/瓶后PC 3细胞COX 2蛋白质的表达。 18只鸡胚分 3组 ,其绒毛尿囊 (CAM )分别接种PC 3细胞以及Lipo、Lipo +COX 2AS ODN、Lipo +COX 2AS ODN +前列腺素E2 (PGE2 ) ,另 6只鸡胚仅接种PC3细胞用作对照。用Leica体视显微镜观察新生血管生成情况。结果　RT PCR示随转染COX 2AS ODN浓度的增加 ,PC3细胞的COX 2mRNA表达逐渐下调 (直到COX 2AS ODN浓度为 0 .2 μmol/L时 )。COX 2AS ODN的作用于 12h后最强 ,以后渐弱 ,4 8h后基本?