摘要：目的检测及克隆小鼠B淋巴瘤A20细胞株mCD99L2基因,构建真核表达载体。方法设计寡核苷酸探针,应用原位分子杂交方法检测A20细胞中mCD99L2基因的mRNA表达,RT-PCR法从A20细胞总RNA中获取mCD99L2 基因含编码区全长cDNA,克隆入T载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定并经序列测定;设计含酶切位点的PCR引物,PCR 获取含mCD99L2基因编码区片段,用限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶切取所需目的片段,利用分子克隆技术与 pcDNA3．1／MycHis C(+)质粒重组,对产生的重组子进行PCR、双酶切鉴定,并经过测序证实。结果原位杂交方法检测 A20细胞中mCD99L2基因mRNA呈阳性表达;RT-PCR法成功获得mCD99L2基因编码区全长cDNA序列,DNA序列测序结果与GenBank提供的已知序列(NM-138309)比较,结果完全一致;重组质粒pcDNA3．1-mCD99L2中的插入片段经DNA测序后与GenBank中mD99L2基因相应序列比较,100％同源。结论小鼠B淋巴瘤A20细胞株存在 mCD99L2基因,采用RT-PCR和T-A技术克隆了A20细胞的mCD99L2基因,成功构建了pcDNA3．1-mCD99L2真核表达载体,为下一步探索mCD99L2基因在小鼠B淋巴瘤A20细胞株中的功能奠定了实验基础。

摘要：谈心谈话是辅导员对大学生的重要教育方式,但是传统的谈心谈话方式具有许多不足。深入探讨了00后学生的特点后,提出了辅导员谈心谈话的以下改良优化措施:分类学生问题,科学分配谈话精力;遵循平等原则,引导学生自我思考;学习新的沟通工具,增强谈话的艺术性。从而提高辅导员谈心谈话的效率,实现学生的自我管理和自我发展。

摘要：目的:检测Tumstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列。方法:利用半定量RT-PCR方法检测Tumstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异。设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从相对正常鼻咽组织中获取Tumstatin蛋白编码序列,T/A克隆入pMD18载体中。利用PCR和酶切鉴定获得阳性重组子。重组子最后经测序证实。结果:与相对正常鼻咽组织相比,Tumstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。RT-PCR法成功获得Tumstatin基因编码区全长cDNA序列。重组克隆质粒插入片段经DNA测序后与GenBank中Tumstatin基因相应序列比较,100%同源。结论:Tumstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。采用T/A技术成功克隆鼻咽组织中Tumstatin基因,为下一步将Tumstatin亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1,探索其在鼻咽癌生长和转移中的作用奠定了基础。

摘要：目的检测Canstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列。方法利用半定量RT-PCR方法检测Canstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异。设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从相对正常鼻咽组织中获取Can-statin蛋白编码序列,T/A克隆入pMD18载体中。利用PCR和酶切鉴定获得阳性重组子。重组子最后经测序证实。结果与相对正常鼻咽组织相比,Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。RT-PCR法成功获得Canstatin基因编码区全长cDNA序列。重组克隆质粒插入片段经DNA测序后与Gen-Bank中Canstatin基因相应序列比较,100%同源。结论Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。采用T/A技术成功克隆鼻咽组织中Canstatin基因,为Canstatin亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1,探索其在鼻咽癌生长和转移中的作用奠定了基础。