摘要：建立高效液相色谱荧光法同时检测鸡血浆中阿莫西林和氨苄西林的残留量。鸡血浆经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,酸性条件下水杨醛沸水浴衍生化后,以0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液（A）和乙腈溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为445nm。阿莫西林和氨苄西林线性范围均为5.0~5 000.0μg/L,线性关系良好（r=0.999 9,0.999 6）。当阿莫西林和氨苄西林添加水平均为5.0~125.0mg/L时,鸡血浆样品平均回收率均高于74.72%,相对标准偏差（RSD）均低于8.65%,日内相对标准偏差分别低于4.99%和10.60%,日间相对标准偏差分别低于7.98%和11.29%。测定鸡血浆样品中AMO的检测限（LODs）为2.0μg/L（S/N=3）、定量限（LOQs）为5.0μg/L（S/N=10）,AMP的检测限为1.0μg/L（S/N=3）、定量限为2.5μg/L（S/N=10）。该方法操作简便、快速,且结果精确、灵敏、可靠,可适用于鸡血浆中阿莫西林、氨苄西林同时提取和检测。

摘要：为了研究联蛋白基因(Zyxin)功能,对Zyxin基因进行了真核表达载体的构建,并对其进行鉴定。用全基因合成的方法得到Zyxin目的基因,将目的基因与pEX-6载体分别进行酶切,然后进行连接,连接产物转化到感受态大肠杆菌。挑取克隆,经质粒DNA抽提和酶切,琼脂糖凝胶电泳和测序,对克隆片段进行鉴定。将重组质粒pEX-6-Zyxin瞬时转染293T细胞。结果显示:电泳、双酶切和测序结果与预期结果相符。转染48 h后观察到红色荧光,用实时荧光定量PCR检测转染后48 h和72 h Zyxin基因mRNA水平有较高表达。表明成功构建了鸡Zyxin真核表达载体,为进一步研究该基因功能奠定了基础。

摘要：为探讨促卵泡素受体(FSHR)基因mRNA在不同组织中的相对表达量和表达规律,探究其调控机制,根据原鸡FSHR基因的编码序列,跨内含子设计1对荧光定量引物,采用qRT-PCR技术检测,研究组织表达谱及其在性腺轴中的表达规律。结果表明:FSHR基因在卵巢和睾丸中高表达,极显著高于其他组织。FSHR基因的表达呈不断变化的趋势,在母鸡卵巢中出壳时最高,持续下降至16周龄时最低,20周龄稍有回升;FSHR表达量在公鸡睾丸中也于出壳时最高,持续下降至16周龄时表达量最低。在公母鸡的垂体组织中,FSHR基因表达呈小幅上升,母鸡较公鸡上升幅度稍大,卵巢中的表达量略高于睾丸。这一研究为进一步研究FSHR基因的作用机制和表达调控提供了素材。

摘要：建立了鹅组织(肌肉、肝脏、肾脏以及皮肤和脂肪)中哌嗪残留的气相色谱-串联质谱检测法。鹅组织经加速溶剂萃取(ASE350),乙腈提取,过Strata-X-C固相萃取小柱净化后的样品在乙酸酐和三乙胺条件下衍生。衍生产物经气相色谱-串联质谱仪(GC-MS/MS)检测,色谱柱为TG-5MS Amine(30 m×0.25 mm i.d.,0.25μm),载气为氦气,进样口和检测器温度均为280℃。采用EI模式,SCAN和SIM扫描定性,Auto SRM结合外标法定量。哌嗪添加量在5.1~2.5×10~3μg/kg范围内,线性关系良好,相关系数为0.9995。在定量限(LOQ:5.1,5.2,5.2,5.2)~2.0×10~3μg/kg的加标水平上,鹅组织中哌嗪的平均回收率为85.2%~95.5%,相对标准偏差(RSD)为1.6%~4.7%,日内RSD为1.2%~5.3%,日间RSD为2.0%~7.7%。检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别在1.4~1.6μg/kg(S/N≥3)和5.1~5.2μg/kg(S/N≥10)之间。方法适用于鹅组织中哌嗪残留的检测。

摘要：为进一步筛选有效的鸡球虫病抗性评价指标，并为后续鸡球虫抗性评价体系的建立及鸡球虫抗病育种提供依据，试验将京海黄鸡分为感染和非感染对照2个组，感染组每只雏鸡灌饲2.5×104个柔嫩艾美尔球虫卵囊，用酶联免疫检测法测定10个球虫抗性血液指标。结果显示，①感染后第3天感染组和非感染对照组的临床表现和各项指标差异均不明显，表明感染后这一阶段无法用现有指标检测到显著变化；②感染后3～5 d感染组鸡体增重为负，且感染组和非感染对照组相比差异极显著（P＜0.01），表明感染后3～5 d的变化最为剧烈；③感染后8 d IFN-γ浓度显著低于非感染对照组（P＜0.05）；丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽—过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）浓度均有不同程度提高，且感染组与非感染对照组SOD浓度差异显著（P＜0.05），其余3个指标均差异极显著（P＜0.01）；④白细胞介素2（IL-2）、IL-16、IL-17、一氧化氮（NO）、β-胡萝卜素（β-C）浓度感染组和非感染对照组相比差异均不显著（P＞0.05）。结果表明，感染后3～5 d内的体增重，CAT、GSH-Px、MDA、SOD 4种抗氧化酶及IFN-γ细胞因子在血浆中的浓度可作为鸡球虫抗性评价指标。

摘要：为建立鸡排泄物中阿莫西林（AMO）和氨苄西林（AMP）残留同时检测的高效液相色谱荧光法,将鸡排泄物先经乙腈提取、饱和二氯甲烷萃取、酸性条件下经水杨醛沸水浴衍生化后,以0.01mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（A）和乙腈溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL·min^-1,荧光检测激发波长为354nm、发射波长为445nm。当AMO和AMP浓度为0.1-250.0μg·g^-1时,该方法呈良好的线性相关,相关系数均为0.999 8。当AMO和AMP添加水平为5.0-125.0μg·g-1时,鸡排泄物中AMO和AMP的回收率均高于71.52%,相对标准偏差均低于9.77%。AMO检测限（S/N=3）为3.0ng·g^-1、定量限（S/N=10）为6.0ng·g^-1;AMP检测限（S/N=3）为1.2ng·g^-1、定量限（S/N=10）为3.5ng·g^-1。该方法简便、灵敏、准确、快速,可满足鸡排泄物中AMO和AMP残留同时提取和检测的要求。

摘要：建立鸡蛋中阿莫西林残留的高效液相色谱荧光检测的方法。鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,水杨醛酸性条件下沸水浴衍生化后,以0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈溶液(B)为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为445nm。阿莫西林在5.0～800ng/mL质量浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数为0.9997。当添加水平阿莫西林为5～125ng/g时,该方法平均回收率为80.47%～89.53%,相对标准偏差为5.77%～6.87%;日内相对标准偏差为8.61%～9.61%;日间相对标准偏差为11.01%～14.80%。阿莫西林检测限为1.2ng/g(RSN=3)、定量限为3.9ng/g(RSN=10)。所建立的方法简便、快速、灵敏度高,适用于鸡蛋中阿莫西林残留的高灵敏度检测。

摘要：建立了气相色谱-串联质谱法检测鸭组织（肌肉、肝脏、肾脏以及皮肤和脂肪）中哌嗪残留的新方法。样品通过加速溶剂萃取（ASE）和固相萃取（SPE）提取、净化，乙酸酐法衍生化后用气相色谱-串联质谱（GC-MS／MS）检测和确证。采用EI模式，SCAN和SIM扫描定性，Auto SRM结合外标法定量。在定量限（LOQs），50，100,500，1000和2000μg／kg的加标水平上，鸭组织中哌嗪的平均回收率为84．24％-95．49％，相对标准偏差（RSDs）为2．03％-5．30％，日内相对标准偏差为1．72％-5．01％，日间相对标准偏差为2．11％-7．35％。哌嗪在鸭组织的检测限（LODs）为1．4-1．5μg／kg（S／N≥3），LOQs为4.8-5.2μg／kg（S／N≥10），其显著低于最大残留限量（MRL）。此方法灵敏度高。定性、定量准确，适用于鸭组织中哌嗪残留的确证检测。

摘要：建立高效液相色谱荧光检测法同时检测鸡组织中阿莫西林和氨苄西林残留的方法。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白,正己烷脱脂,饱和二氯甲烷萃取,上清液经水杨醛在酸性条件下沸水浴衍生化。以C18柱为固定相、0.01 mol/L的磷酸二氢钾溶液和乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1 m L/min,荧光检测激发波长为358 nm,发射波长为440 nm。阿莫西林和氨苄西林在25-1 000μg/kg体重范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9994。当阿莫西林和氨苄西林添加水平在10-100μg/kg体重时,鸡组织样品中平均回收率均高于68.65%,相对标准偏差均低于10.74%。阿莫西林、氨苄西林在鸡组织中的检测限均分别为5、3.5μg/kg体重,阿莫西林、氨苄西林的定量限均分别为13、10μg/kg体重。该方法灵敏、准确、快速,适用于鸡组织中阿莫西林、氨苄西林残留的同时检测。

摘要：为探究白介素6(IL-6)基因5′启动子区单核苷酸突变对鸡柔嫩艾美尔球虫抗性指标的影响,以京海黄鸡为试验材料,对IL-6基因5′调控区单核苷酸多态性(SNPs)进行检测,根据感染组与对照组血浆抗性指标酶联免疫吸附试验检测结果,分析SNPs突变形成的基因型与抗性指标的关联。结果表明:感染组与对照组间过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量差异极显著,超氧化物歧化酶(SOD)活性及IL-2、IL-16、IL-17、γ干扰素(IFN-γ)水平和体增重差异显著;通过京海黄鸡IL-6基因启动子区基因序列与GenBank上的SNPs数据库比对,发现3个新的SNPs(A-663G、C-447G和G-357A),其中A-663G位点只有1种基因型GG,C-447G和G-357A位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态且多态性丰富;C-447G突变位点各基因型间比较发现,血浆CAT、SOD、GSH-Px活性及IL-2、IL-16、IL-17水平和体增重差异极显著,MDA含量差异显著;G-357A突变位点各基因型间比较发现,血浆CAT、SOD活性及IL-16水平和体增重差异极显著,GSH-Px活性和IL-17水平差异显著。就主要抗性指标而言,C-447G和G-357A2个突变位点的CC和AA纯合型个体优于其他基因型个体,CC和AA基因型分别为2个突变位点鸡球虫抗性有利基因型,这一结果为京海黄鸡鸡球虫抗性分子标记辅助育种提供了参考。