摘要：淀粉加工和利用是广西的支柱产业,各种优良淀粉酶的开发一直是研究热点。本文从云南腾冲热海温泉分离到一株产嗜热Ⅶ-淀粉酶的菌株Geobacillus ***1,经扩增其16Sr DNA测序比对,表明其与已公布基因组序列的嗜热芽孢菌Geobacillus sp.C56-T3具有99%的相似性。根据Geobacillus sp.C56-T3的AMY2基因设计引物,从Geobacillus ***1中扩增出Ⅶ-淀粉酶基因HBCANH1,其与AMY2基因的核苷酸序列和氨基酸序列的一致性分别为96.7%和98.0%,以p ET-22b(+)为载体构建重组质粒p HBCANH1并在大肠杆菌中获得了外源基因的表达,经破胞后测得表达活力为172.38U/m L。重组酶HBCANH1最适反应温度为70℃,最适反应p H为6.4,具有较好的应用研究前景。

摘要：采用响应面法对康宁木霉产纤维素酶的发酵条件进行了优化。首先运用Plackett-Burman法筛选出3个影响较大的重要因素,分别为:葡萄糖,MgSO4.7H2O,MnSO4.H2O。然后进行最陡爬坡实验,确定这3种重要因素的最适质量浓度范围。最后通过Box-Behnken设计,利用Design Expert软件进行回归分析,得出3种因素的交互作用及最佳发酵条件。确定康宁木霉发酵产纤维素酶的最佳发酵培养基为葡萄糖5.97 g/L,乳清粉7 g/L,玉米浆干粉13 g/L,(NH4)2SO4 4 g/L,KH2PO4 8 g/L,MgSO.4 7H2O 0.56 g/L,CaCl.2 2H2O 0.6 g/L,FeSO.4 7H2O 2.5 mg/L,ZnSO4.7H2O 0.7 mg/L,CoCl.2 6H2O 1.9 mg/L,MnSO.4 H2O 4.07 mg/L,吐温-80 1.5 mL/L,在此培养基下发酵酶活为0.233 IU/mL,比优化前提高了35.7%。