摘要：目的探讨TTV的基因变异及其与致病性的关系。方法在ORF1区的高变区设计特异性引物建立巢式多聚酶链反应(PCR),扩增献血员与慢性非甲-庚型重型肝炎患者血清中的TTVDNA。PCR产物纯化回收后进行分子克隆,每例挑选10个不同TTVDNA克隆进行测序。不同TTVDNA克隆之间及其与日本株TA278之间进行序列比较并进行进化树分析。结果成功地构建了TTVDNA克隆。与G1a亚型TA278的序列相比较有74%～95%的同源。献血员存在2种不同的TTV病毒株,其序列有7%的差异,都为G1a亚型。慢性非甲-庚型重型肝炎患者中存在7种不同的TTV病毒株,彼此之间序列有5%～24%不同,分别属于G1a和G1b亚型。结论慢性非甲-庚型重型肝炎患者中TTV的基因变异比献血员中的复杂得多。TTV基因变异的复杂性及其基因变异过程中可能产生的强毒力病毒株均有可能在其致病机制中起一定作用。G1b亚型可能有一定的致病性。

摘要：目的 :研究乙型肝炎病毒感染患者TTV重叠感染情况及初步探讨TTV的致病性。方法 :在ORF1区设计特异性引物建立巢式多聚酶链式反应 (PCR) ,检测乙型肝炎病毒感染患者血清中TTVDNA ,对PCR产物进行分子克隆和测序。结果 :献血员、慢性乙型肝炎病毒携带者、慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者TTVDNA阳性率分别为 10 %、11%、2 7%、4 8%。其中前两者与后两者比较均有显著差异 ,慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者相比也有显著差异 (P 0 .0 5 )。慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者的ALT和TBIL在TTVDNA阳性病人组与TTVDNA阴性病人组之间比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TTVDNA阳性病人组明显高于TTVDNA阴性病人组。结论 :献血员中存在TTV感染 ,乙型肝炎病毒感染患者重叠感染TTV较常见。慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者TTVDNA阳性率明显高于献血员和慢性乙型肝炎病毒携带者的阳性率 ,提示TTV的重叠感染可能是HBV感染病情加重因素之一 ,TTV重叠感染对HBV的复制可能不存在相互作用。

摘要：目的探讨凝血酶原活动度(prothrombin activity,PTA)在重型病毒性肝炎患者中动态变化及其临床意义.方法前瞻性对该院2002年8月～2003年3月间收治的重型肝炎患者,按设计要求自入院后24 h内及以后每周抽取患者抗凝全血1次,采用全自动血凝分析仪检测PTA,并同时检测有关血清生化指标,动态观察其变化.将其中资料完善的79例作为研究对象,统计分析有关资料.结果死亡组平均PTA为(25.5±14.3)%,存活组平均PTA为(46.9±15.2)%,两组间差异非常显著(P＜0.01).并发现PTA迅速下降者病情恶化,预后不良;PTA稳步回升者预后良好,始终低于10%者无一例存活.结论该组资料显示血浆PTA值在衡量肝功能损害的严重程度、判断疗效、估计预后是最敏感和可靠的指标,比其他肝功能试验的价值更大.

摘要：目的探讨针对FOXO3a的小干扰RNA(siRNA)对HepG2 FOXO3a的表达、细胞增殖的抑制及细胞凋亡的作用。方法利用RNA干扰(RNAi)效应设计针对FOXO3a的不同siRNA,构建表达载体质粒并转染HepG2细胞系。RT-PCR和Western Blot分别检测FOXO3a mRNA及蛋白的表达,细胞生长实验和流式细胞观察转染前后细胞增殖及细胞凋亡的变化。另设一无意义RNA载体质粒为阴性对照。结果P2、P3实验组,细胞核绿色荧光明显减淡,有细胞核的排出。特异性siRNA对FOXO3a mRNA及蛋白的表达具有抑制作用(P<0.05),细胞凋亡减少,增殖明显增加(P<0.05)。结论抑制FOXO3a基因的表达能够减少HepG2细胞的凋亡,并增加细胞的增殖。FOXO3a有望成为治疗肝癌的有效的靶基因。