摘要：《临床免疫学检验》是医学检验专业一门重要的专业课,与基础医学和临床学科关系密切,在临床疾病的诊治中发挥着重要作用。根据课程特点和学生实际情况对《临床免疫学检验》课程内容进行模块化设置(理论内容分为基础理论、实验技术和临床免疫性疾病及其检测项目3个模块;实验内容分为临床试验和研究性实验2个模块),从而整合了不同模块课程内容,适应了学生的认知规律,进而激发了学生学习兴趣和主动性,提高了课堂教学质量。

摘要：目的研究模拟肺癌患者血浆DNA中APC基因甲基化最低检测限,确定不同甲基化检测技术在早期肺癌诊断中的价值。方法用普通甲基化特异性基因扩增(methylation specific PCR,MSP)方法检测肺癌细胞株NCI-H460细胞APC基因,以酚-氯仿经典方法提取NCI-H460细胞DNA,紫外分光光度计定量并以10倍稀释的浓度梯度依次投入相同的健康人血浆200μl中去,得到模拟肺癌患者血浆,利用磁珠核酸提取方法从模拟血浆样本中提取血浆DNA。对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以Sybr-GreenⅠ为染料进行实时荧光定量MSP检测,同时进行普通MSP检测。结果NCI-H460细胞中的APC基因启动子1A区719位点存在甲基化,实时荧光定量MSP检测模拟肺癌患者血浆APC基因甲基化的最低检测限为在200μl血浆中能检测出102个肿瘤细胞的DNA,而以普通MSP检测,200μl血浆中需投入103个以上肿瘤细胞的DNA才有弱阳性条带。实时荧光定量MSP检测技术比普通MSP检测的敏感性至少高出10倍。结论实时荧光定量MSP比普通MSP检测灵敏度高,该技术用于肺癌患者血浆DNA甲基化检测,可能有助于肺癌早期诊断。

摘要：为了培养医学检验专业学生运用科研思维能力进行临床科研设计,以适应社会对人才的需求,在临床实习中通过导师制及导师团队的运用,提高学生对海量临床实验数据进行分析和处理的能力,通过查阅文献资料分析现象查找原因,在导师团队的帮助下解决临床实际工作中遇到的问题。学生在分析和解决问题的过程中,培养和锻炼了科研思维能力、科研设计能力和实践动手能力,并将书本知识与临床日常工作有机结合起来,拓展了自主学习和团队合作的能力,取得良好的教学效果。

摘要：目的以熔解曲线法测定4株肺癌细胞株和肺癌病人APC基因启动子区的甲基化模式。方法以脐血淋巴细胞DNA及其转甲基后的DNA经化学修饰、克隆测序的质粒，作为完全非甲基化和完全甲基化标准品。设计通用引物，采用加入荧光染料SYBRGreen1的荧光定量PCR法扩增包含21个CpG位点的APC基因启动子区的目的序列，以熔解曲线法通过与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值比较，确定四株肺癌细胞株（NCI-H446，NCI-H460，SPCA1，NCI—H520）在该区段的甲基化模式，并通过克隆测序验证。同时测定两例肺癌患者癌组织中APC基因启动子区甲基化模式。结果四株肺癌细胞株中，NCI-H446，SPCA1和NCI—H520的Tm值与完全非甲基化标准品的Tm值相同，而NCI—H460的Tm值有两个，分别与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值吻合，并经克隆测序验证。两例肺癌患者癌组织的Tm值位于完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值之间。结论小细胞肺癌细胞株NCI—H446，肺腺癌细胞株SPCA1和肺鳞癌细胞株NCI—H520的APC基因启动子区为完全未甲基化型，而大细胞肺癌细胞株NCI—H460APC基因启动子区甲基化模式为等位基因杂合型。两例肺癌患者癌组织中的APC基因启动子均为部分甲基化型。熔解曲线法是简单、经济和实用的甲基化模式检测方法。