摘要：在端粒酶阳性的肿瘤细胞中引入带突变模板的人端粒酶RNA亚基(MT-hTR)是一种新颖的抑制肿瘤细胞生长的方法.本研究通过构建MT-hTR真核表达重组体,初步观察其对人宫颈癌HeLa细胞生长的影响.通过分子克隆技术及PCR介导的定点突变技术构建野生型及突变型hTR表达重组体,将空载体及重组体分别与质粒pEGFP-C1通过脂质体共转染HeLa细胞,经药物G418的筛选得到稳定表达外源基因的细胞.RT-PCR检测目的基因的表达,TRAP分析细胞的端粒酶活性,并通过MTT法绘制各组细胞的生长曲线.结果发现,重组体在细胞内能成功表达目的基因,并且在Mutant1转染细胞中检测到相应的突变型端粒酶活性.构建的4个MT-hTR重组体中,有3个能使HeLa细胞生长速度减缓.以上结果提示,在HeLa细胞内表达MT-hTR能抑制细胞的生长速度,并且突变模板的设计可能会影响到抑制效应的发挥.

摘要：基于微信的分子医学自主学习平台以自主学习模式为框架,在教学中能引导学生由被动学习逐步向主动学习方式转换、由记忆模仿的思维方式向独立思考的学习能力迈进,对综合创新人才的培养有现实意义。文章通过对平台的设计和应用,表明其教学效果良好。

摘要：目的用配基指数富集的系统进化技术(SELEX)技术筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3的DNA适配子。方法构建随机ss DNA文库,两端为固定序列,中间为39 nt的随机序列,总长度为85 nt,将NS3蛋白包被在96孔板上,ss DNA与NS3蛋白进行亲和反应,洗去未结合的ss DNA,洗脱回收与NS3蛋白结合的DNA,PCR扩增后,磁珠法分离成单链。重复以上筛选步骤,直至筛选出高特异性和亲和力的核酸适配子。将核酸适配子连接质粒载体克隆转入大肠杆菌,挑选阳性克隆提取质粒外送到公司进行测序。结果通过8轮筛选,成功筛选出DNA适配子,并获得其中6条克隆的DNA一级序列。6条适配子序列长度相同,均为85 nt,两端固定序列与设计相符,中间为随机序列,随机序列无共同保守系列。所有寡核苷酸适配子的二级结构以茎环和凸环为主。结论以NS3蛋白作为药物研究的靶点,结合SELEX筛选技术研究其核酸适配子,具有巨大的潜力和研究价值。