摘要：目的构建结核分枝杆菌TB10.4的原核重组表达体系并表达TB10.4,分析其反应原性。方法 GenBank报道的结核分枝杆菌标准株H37Rv TB10.4基因序列设计并合成引物,从H37Rv基因组DNA为模板PCR扩增TB10.4基因片段,克隆至pMD-18T载体后转化大肠埃希菌JM109,筛选和鉴定阳性克隆,并进行测序分析。将TB 10.4基因插入原核表达载体pET-28a后转化大肠埃希菌*** DH5ɑ,PCR和双酶切鉴定阳性的重组子转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达TB 10.4蛋白。冰浴超声裂解重组菌,His-bindTM柱层析纯化TB10.4蛋白,Western blot分析其反应原性,ELISA评价其诊断结核病的价值。结果 PCR扩增和克隆获得TB10.4基因片段,大小约300bp,与GenBank中报道的序列一致。将TB10.4基因片段插入原核表达载体,构建TB10.4蛋白重组表达体系,金属螯合层析获得分子质量单位约为10.4ku的TB10.4。Western blot证实TB10.4蛋白可被结核患者血清特异识别。以重组TB10.4为抗原采用ELISA诊断结核病的灵敏度为88.5%,特异度为97.3%,阳性预测值93.8%,阴性预测值94.8%,诊断效率94.5%。结论成功构建了TB10.4蛋白的重组表达体系,表达的TB10.4蛋白具有反应原性,可用于结核病的免疫诊断。

摘要：目的 :探讨活动性结核患者甲状腺激素水平的变化及其临床意义。方法 :采用回顾性研究设计方法,收集湖南省胸科医院2016年1月~2016年12月活动性结核患者(包括菌阴结核组200例和菌阳结核组83例)和78例健康体检者(作为对照组)血清甲功5项FT3、FT4、TT3、TT4和TSH的结果,用统计学软件SPSS20.0分析结核患者治疗前后甲状腺激素水平的变化。结果 :治疗前血清FT3、FT4、TT3和TT4水平在3组间比较,差异均无统计学意义,菌阳结核组和菌阴结核组TSH水平均低于对照组,TSH水平在菌阳结核组和菌阴结核组间比较,差异无统计学意义。283例结核患者治疗2个月后,血清FT4、TT3和TT4水平下降,TSH水平上升,FT3水平变化无显著性差异。治疗前后甲减发生率分别是1.77%(5/283)和4.95%(14/283),两者比较有显著性差异。结论 :结核病发生发展过程中,甲状腺激素水平下降,易发生甲减,临床应重视结核患者甲功5项的监测。

摘要：目的了解安徽、湖南、江苏省结核分支杆菌的基因型状况及其分子流行病学规律。方法以结核分枝杆菌插入序列IS6110序列为模板,设计一对特异外向引物,建立一种结核分枝杆菌的快速分子生物学分型方法——IS6110PCR分型方法,进行三省结核病分子流行病学研究。结果根据IS6110PCR指纹图谱,191株安徽、湖南和江苏三省的结核分枝杆菌菌株可被分成6个主要的基因型(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ和Ⅵ),江苏省的主要基因型为I和V型,安徽省的主要基因型为III型,湖南省的主要基因型为I和II型,V型菌株全部为江苏省菌株,IV型菌株全部为湖南省菌株。结论三省之间结核分支杆菌的基因型存在明显的差异,各自存在着独立的流行菌型,其真实原因有待进一步研究。