摘要：目的筛选并优化冻干保护剂组合,建立可室温稳定储存的、不影响试剂检测灵敏度的Cas12a鼠疫菌核酸检测冻干体系,为其应用于动物鼠疫监测的现场快速检测奠定基础。方法以鼠疫耶尔森氏菌pla基因为靶基因,选择9种常用冻干保护剂加入核酸检测试剂中,筛选有明显保护效果的4种保护剂进行优化。按照正交实验设计原则设计保护剂组合,通过37℃加速破坏实验及26℃室温稳定性实验对复合保护剂进行保护效果和灵敏度评价。结果加入蔗糖、山梨醇和海藻糖3种保护剂的冻干检测体系可在37℃稳定存放2周。室温下存放3个月后体系检测信号强度与37℃加速破坏1周时基本相当,同时检测方法的灵敏度依然能达到10-5 ng/μL,说明Cas12a检测试剂加入筛选得到的保护剂冻干后,可在室温下稳定保存至少6个月。结论本研究构建的室温稳定CRISPR/Cas12a鼠疫菌检测体系可在室温下稳定存放至少半年,能够满足鼠疫菌现场快速检测中对试剂稳定性的需求。同时,本研究获得的复合保护剂组分对构建其它室温稳定CRISPR/Cas12a核酸检测体系具有重要参考价值。

摘要：目的:利用特异的肽核酸(PNA)探针、链霉亲和素包被的磁珠和cy5纳米颗粒,通过荧光扫描技术,建立一种特异、快速、准确地检测鼠疫耶尔森氏菌的方法。方法:针对鼠疫耶尔森氏菌pMT1质粒上的caf1基因设计并合成一对特异PNA探针,经生物素标记后,分别与链霉亲和素包被的磁珠和cy5纳米颗粒结合;将探针与待测鼠疫耶尔森氏菌的基因组DNA杂交后,利用荧光扫描技术进行检测。探讨了多个实验因素对测定的影响,并进行了特异性和灵敏度检测。结果:建立并优化了利用PNA探针检测鼠疫耶尔森氏菌的方法,得到较好的线性关系;检测的灵敏度为0.9μg/mL(待测DNA)。结论:PNA探针与靶基因的结合不易受杂交液离子强度的影响,结合后具有较高的稳定性。本研究建立的分析方法能够灵敏、特异、稳定地对鼠疫耶尔森氏菌进行定量检测,为鼠疫的监控、诊断提供了有力手段。

摘要：目的：系统评价宫颈解脲支原体（UU）感染与孕妇不良妊娠结局的关系。方法：采用Cochrane系统评价方法,根据PICO原则提出关键词、主题词,主要采用计算机检索,通过中国期刊全文数据库（CNKI）、中文科技期刊全文数据库（VIP原维普）和万方数字化期刊全文库等,收集国内公开发表的有关宫颈UU感染与不良妊娠结局的相关文献,根据纳入与排除标准对文献进行独立筛选,应用队列研究的NOS评价标准对纳入的文献进行质量评价,采用Excel自行设计数据提取表提取数据,最后采用Revman 5.2软件进行合并相对危险度（RR）值的Meta分析。结果：最终纳入9篇中文文献,累计宫颈UU阳性1 485例,阴性2 485例。Meta分析结果显示,宫颈UU阳性组和阴性组胎膜早破〔RR=3.03,95%CI（1.69-5.43）〕和早产〔RR=3.51,95%CI（2.08-5.94）〕的发生率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：目前国内现有研究提示,孕妇宫颈UU感染与早产和胎膜早破不良妊娠结局有因果关联。受纳入研究质量限制,以上结论有待开展更多高质量研究予以验证。