摘要：β-酮脂酰-ACP合酶——KAS是脂肪酸合成中的一种缩合酶,主要是在缩合反应中起作用。研究以近成熟的油桐种子为材料,根据GenBank中蓖麻等已知的β-酮脂酰-ACP合酶基因KASⅢ的序列设计简并引物,利用PCR、RACE等技术克隆得到了油桐KASⅢ基因的全长cDNA序列。该基因序列全长1 901 bp,开放阅读框为1 209 bp,编码403个氨基酸,通过与其他物种的KASⅢ氨基酸序列比对,油桐KASⅢ基因与麻疯树的同源性最高,达90%。软件预测表明,KASⅢ蛋白等电点为5.78,存在跨膜结构域,整个蛋白质基本上是表现出亲水性的。将该基因命名为vf-kasⅢ。

摘要：植物自交不亲和性(SI,self-incompatibility)中SSI和GSI主要受S位点控制。油茶属于后期自交不亲和(LSI,late-acting self-incompatibility)植物,油茶自交不亲和性已成为油茶产业发展的制约因素。为探究油茶自交不亲和分子机制,本研究以前期研究的油茶雌蕊转录组数据和已完成基因注释的油茶良种华硕全基因组数据中获得的5条S-RNase(CoSRNase)基因组序列为基础设计引物,从10个油茶品种的叶片DNA中扩增CoS-RNase外显子,结合雌蕊CoS-RNase的cDNA全长克隆预测CoS-RNase氨基酸多态性位点,共获得28条CoS-RNase等位基因。基因结构分析显示CoS-RNases基因包含4个外显子和3个内含子;cDNA全长1141 bp,ORF 717 bp,编码238个氨基酸,进化分析显示CoS-RNase与茶树CsS-RNase同源性最大;序列分析确定CoS-RNases具有T2 RNase蛋白家族的两个保守结构域和活性位点,同时有与苹果、梨等S-RNase相同的作用位点:降解RNA的组氨酸(His,119位)位点和解聚肌动蛋白的脯氨酸(Pro,156位)位点;体外重组蛋白实验表明CoS-RNase蛋白具有RNase活性,能抑制花粉管的生长;qRT-PCR分析CoS-RNase在油茶花粉中几乎不表达,其他各组织中均有表达,同时在自花授粉和异交授粉后花柱和子房中的表达模式与花粉管生长规律相吻合。以上结果说明CoS-RNase很可能直接参与了油茶的自交不亲和性反应,是调控油茶自交不亲和性反应的重要因子。本研究可为进一步探索油茶自交不亲和性反应的分子调控提供理论基础。

摘要：油桐是我国四大木本油料植物之一,当前对油桐的研究主要集中在栽培选优及低产林改造方面,而对油桐脂肪酸延长代谢的分子机理研究尚未见报道。本研究以油桐果实膨大期、油脂转化初期和油脂转化高峰期的种子为材料,采用高通量RNA测序技术对油桐种子脂肪酸延长代谢的3个不同时期转录组进行比较,以nr、Swiss-Prot、KEGG和COG 4个蛋白数据库为参考,对油桐种子脂肪酸延长代谢进行了综合性分析。研究结果表明,参与油桐种子脂肪酸延长代谢途径的非冗余基因序列共37条,涉及的主要酶功能基因有9种;在果实膨大期、油脂转化初期和油脂转化高峰期中,调控脂肪酸延长代谢途径的基因存在明显的表达差异。综合分析结果绘制了油桐种子脂肪酸延长代谢途径,揭示了调控油桐种子脂肪酸延长代谢过程的基因作用规律。这些研究结果为油脂合成的遗传改良提供了资源和技术基础,同时为油桐分子设计育种提供了一定的科学依据。

摘要：为了揭示油桐乙酰辅酶A羧化酶accA基因的序列特点和结构功能,从而为该基因的深入研究和开发利用奠定基础,以葡萄桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐乙酰辅酶A羧化酶α亚基全长cDNA序列。测序结果表明:该基因cDNA序列全长2 313 bp,编码770个氨基酸;以其推导出的α亚基氨基酸序列蛋白的等电点pI为8.48,相对分子量为85 902.7 Da,稳定系数为37.33。生物信息学分析结果表明:此蛋白含有4个比较明显的跨膜区,是一个不稳定的非分泌蛋白。模体搜索结果表明:在α亚基上有羧基转移酶域和ACCA功能域;其三级结构中有14个α螺旋,整体呈球型,并有一个向外延伸的结构。该基因已登录到GenBank,命名为VfCTα。

摘要：油茶种子胚乳中富含脂肪、多糖和酚类公合物,要获得高质量的RNA难度较大。本研究以油茶优良无性系湘林1号近成熟种子的胚乳为实验材料,在试剂盒的基础上应用改良的CTAB法提取总RNA。结果表明,使用改良后的CTAB法配合试剂盒提取RNA操作简单,且能够有效去除油茶种子中多糖和多酚类等次生物质,从而得到高质量的RNA。以获得的RNA为模板,设计简并引物,通过RT-PCR,成功从油茶种子中鉴定出了油脂合成的关键酶基因之一△8脂肪酸脱饱和酶基因,命名为Cod8FAD(Camellia oleifera delta 8 fatty acid desaturase),该基因与茶树△8脂肪酸脱饱和酶基因相似性最高,为97%,与耧斗菜△8脂肪酸脱饱和酶基因相似性最低,为62%。

摘要：济南铁路局档案馆自2002年始,开展了续修《山东省志铁路志》和《济南铁路局志》的工作.新一轮修志,遇到许多新情况、新问题,特别是档案史志机构经历了几次精简和撤并,关系不顺、力量不足的问题十分突出:撰稿人队伍均有自己的本职工作,忙起来难以统筹兼顾,机构队伍现状与续志工作要求极不适应.面对这些难点如何推进续志工作?我认为,关键要创新工作思路,采取新的方法措施,保证续志工作顺利推进.

摘要：功能语言学理论框架下,基于MedDEAP语料库生成了医学学术英语论文实现概念功能、人际功能和语篇功能的词表,反映了该语体在三大元功能上的语言特征和分布规律,描述了翻译医学学术英语论文所遵循的学术语言规约,即在及物性上选择体现物质、关系、心理、言语过程,通过主语的选择表达不同身份建构意识,情态动词的使用上倾向低中量值,通过原因—条件类连接词形成译文的逻辑关联。学术英语翻译在语言选择上必须符合其话语共同体的惯例,而语料库所反映出的语言使用的概率性和典型性,对学术英语翻译研究具有一定的启示意义。

摘要：采用正交设计的方法对梨ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq DNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用DPS数据处理软件分析,建立的梨ISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:Taq DNA聚合酶1.0U、Mg2+的浓度2.0 mmol·L-1、模板DNA 10～80 ng、dNTPs 0.10 mmol·L-1、引物0.3μmol·L-1。对梨ISSR-PCR最佳反应体系进行了梯度退火试验,得到的最佳退火温度为55℃。

摘要：在油茶cDNA文库和EST文库构建的基础上，根据油茶金属硫蛋白的EST序列设计特异引物，以油茶近成熟种子为材料，利用3＇RACE技术，克隆到1个金属硫蛋白基因的cDNA全序列。该基因全长为675bp，其中5＇非编码区59bp，3＇非编码区379bp，开放阅读框长234bp，编码78个氨基酸；该蛋白含有14个半胱氨酸，分布在蛋白质的N端和C端，呈CC，CX，CXXC形式排列。预测该蛋白相对分子量为7864．9Da；等电点为4．86；37～48位氨基酸间有较强的疏水区。多序列比对发现油茶MT核苷酸序列与茶的相似性达到99％，推导的氨基酸序列与茶完全相同，因此将该基因命名co_mtl。

摘要：以油桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐长链脂酰辅酶A合成酶基因家族的两个成员的全长cDNA序列,分别命名为VfLACS4(Gen Bank登录号:KP996689)和VfLACS8(Gen Bank登录号:KT362743),通过实时定量PCR的方法检测了不同组织部位和种子不同发育时期该基因的表达水平,并采用索式提取法测定了种子发育时期的油脂含量。结果表明:VfLACS4的CDS长度为1 989 bp,编码662个氨基酸,与其他物种的LACS4氨基酸序列具有较高的相似性,其中与蓖麻的LACS4相似性最高;VfLACS8的CDS长度为2 199 bp,编码732个氨基酸,与麻疯树和蓖麻的LACS8具有较高的相似性;实时定量RT-PCR结果表明VfLACS4基因在花、茎、叶和根中均有少量表达,并在种子发育的10月10日表达量达到最大;VfLACS8基因在种子、花、茎、叶和根中均有一定量的表达,在雌蕊中的表达量最高;油桐种子发育过程中的油脂积累呈现出"S"型,Vf LACS8基因的在发育种子中的表达模式与之相一致,推测VfLACS8基因与种子发育过程中的油脂积累相关。