摘要：目的探讨肿节风SCAR分子标记克隆与验证。方法从随机引物库中挑选出45条10碱基的随机引物,采用RAPD方法对4种不同产地肿节风基因组DNA进行扩增,从中筛选出S41号引物扩增的RAPD分子标记,克隆测序后,经比对确定其同源序列获得SCAR分子标记,设计引物,对9种不同产地的肿节风和3种同科混淆品鸡爪兰、及己与金粟兰进行特异PCR扩增,验证引物特异性。结果RAPD扩增获得中药肿节风的SCAR分子鉴定标记,据此设计出鉴定肿节风的特异引物,PCR扩增显示肿节风在500 bp左右处均出现有条带,与预期扩增长度基本相符,而3种同科植物均未出现条带。结论本研究获得肿节风SCAR分子标记,并设计出特异引物,可用于鉴别该药材与其混淆品。

摘要：利用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除人Huh7肝癌细胞的血管紧张素转化酶2(ACE2)基因,构建ACE2基因敲除细胞株,为研究ACE2在肝细胞癌的作用提供细胞模型。首先,对ACE2结构域进行鉴定,利用在线网站设计两条破坏所有结构域、靶向作用于ACE2外显子的sgRNA。其次,构建重组载体并转染肝癌细胞Huh7,嘌呤霉素筛选出单克隆细胞株。最后,免疫印迹鉴定敲除效果。结构域鉴定结果显示,在340-520号氨基酸位置存在Zn结合位点和激活位点,根据sgRNA靶点设计原则,采用片段敲除的方式,针对ACE2的第9、第10外显子设计两对sgRNA,并成功构建PX459-ACE2-sgRNA重组质粒。嘌呤霉素成功筛选出单克隆细胞株,并测序证实了发生片段敲除,ACE2蛋白在敲除细胞株中不表达;成功构建ACE2敲除的Huh7细胞株,为日后研究ACE2在肝细胞癌的发生机制奠定基础。

摘要：21世纪是生物学迅速发展的时代,分子生物学已成为生命科学的领头羊,其理论与基本技术迅速渗透到基础医学和临床医学的许多领域,并且得到越来越广泛的发展应用,呈现出巨大的生命力。分子生物学是一门实践性很强的学科,理论知识抽象,内容多,有一定的深度,学生较难理解,因此实验课的教学在整个分子生物学课程中显得尤为重要[1]。众所周知,研究生是我国科研力量的后备人才,培养其良好的综合素质、创新思维和实际科学研究的能力是研究生教学工作的重点。随着我校研究生招收人数的不断扩大,选修分子生物学实验课的学生呈逐年增加的趋势。回顾过去的研究生实验课教学的情况,存在着一些不足,主要表现在:①实验的仪器设备缺乏,学生不能人人动手。②实验内容陈旧老化,先进的分子生物学技术几乎不能引进到实验课中。③实验流程安排不紧凑,不合理。④实验课中以传统的灌输式教学为主,教师示教的内容太多。上述问题严重束缚了研究生的动手能力和综合分析问题的能力。为此,结合几年来的教学实践,我们拟从下面几个方面对研究生分子生物学实验进行改革尝试。1教学内容的改革和实验课程的实施结合我室的现有条件和研究生课题研究的需要,开设30个学时以重组DNA技术为主线,紧紧围绕分、切...

摘要：随着信息时代的到来,计算机技术、互联网技术的高速发展为线上线下相结合的混合式教学模式提供了无限可能。混合式教学指线上授课、自主学习与线下面授教学的混合,强调借助丰富的媒体化资源,鼓励自主、合作与碎片化学习,是对传统教学的内涵式提升和外延式发展。据调查,在新冠疫情发生后有76.5%的高校教师愿意采用“线上+线下”的混合式教学,有过在线教学经历的教师大多数对在线教学持积极的接受态度,不愿意继续采用混合式教学的教师比例只有9.8%[1],说明教师通过自身的教学实践逐渐认识到了在线教学的优势。

摘要：在医学教育国际标准"本土化"的背景下,进行课程整合,将传统的生物化学课程中与人体代谢有关的部分内容,结合临床问题,设计人体代谢与疾病整合课程,为这门整合课程设计相应的教学案例,从而为开展PBL、CBL、TBL等模式的教学提供相应的素材。