摘要：[目的]构建较高亲和力较低免疫原性的CD20抗体。[方法]通过专利分析,进行高亲和力和人源化的设计改造,将抗体的轻链和重链分别克隆到pc DNA3.1/ZEO(+)、pc DNA3.1(+)真核表达载体中,共转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1,通过RT-PCR检测mRNA的转录,夹心ELISA检测抗体表达量,流式细胞术检测细胞上清与CD20阳性细胞Raji的结合活性。[结果]得到了高亲和力的人源化CD20抗体的轻链和重链基因片段,并成功地构建了重组表达载体pc DNA3.1/ZEO(+)-CD20L和pc DNA3.1(+)-CD20H,并可在CHO-K1细胞中表达,通过RT-PCR证明基因在CHO细胞中成功表达,ELISA法测得培养上清的含量在0.45~4.72μg/m L之间,流式检测表明上清中的抗体可与Raji细胞结合。[结论]成功构建并表达筛选了17株单克隆抗体,15号的表达量最大,为4.72μg/m L,为下一步研究抗体的亲合力、免疫原性以及生物学功能打下基础。