摘要：目的表达纯化肠出血性大肠杆菌（EHEC）0157：H7的紧密黏附素（intimin）及突变体intiminN916Y，并构建其转位紧密黏附素受体（translocatedint intin receptor，Tir）结合片段（intiminbinding domain，Tir-IBD），通过BIACore技术检测紧密黏附素及突变体intiminN916Y与***蛋白质相互作用特性的变化，探索特定氨基酸的突变对其黏附结合功能的影响。方法设计引物采用PCR法自EHEC0157：H7基因组扩增Tir—IBD的编码基因tir-~d，TA克隆后构建原核表达质粒pET-21a（＋）-tir—ibd，经测序鉴定后转化最coliBL21（DE3），IPTG诱导表达，PAGE检测。目的蛋白经***亲和纯化后，再用阴离子交换柱ResourceQ和分子筛柱Superdex200进行纯化。同时按包涵体复性后纯化的方案制备紧密黏附素及突变体intiminNgl6Y，将所得高纯度目的蛋白Tir-IBD适当稀释后耦联BIACore3000配套的NTA芯片，在25℃和37℃条件下分别以紧密黏附素及突变体***916Y作为流动相进行BIACore检测。结果EHEC0157：H7基因组扩增出了约270bp的目的片段；原核表达质粒pET-21a（＋）-tir-ibd经酶切及测序鉴定与设计序列一致。转化EcoliBL21（DE3）后IPTG诱导目的蛋白表达率约15％；PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量（肘，）约10x103，破菌后电泳证实目的蛋白为可溶表达。Ni-NTA亲和纯化和阴离子交换纯化效果明显，高纯度的Tir-IBD蛋白耦联NTA芯片，在25℃和37℃条件下对紧密黏附素及突变体intiminN916Y与＇***相互作用的BIACore检测结果显示，intiminN916Y特定氨基酸的突变对其结合能力有明显影响并呈温度依赖性。结论EHEC0157：H7的紧密黏附素、突变体intiminN916Y及Tir-IBD经基因克隆后获得了较好的表达，纯化后获得高纯度的目的蛋白。在此基础上建立了蛋白相互作用的BIACore检测体系，证明intiminN916Y特定氨基酸的突变对其结合能力有明显影响并呈温度依赖性。

摘要：新型可降解血管支架可降低异物留存体内的顾虑,因此广受重视且已有产品进入临床。但这些支架的可降解性质可能带来更多与血栓相关安全性的担忧。现有GB/T 16886.4标准明确其必须进行血栓相关评价,但未给出具体的评价方法。本研究以实验猪为模型,通过体内植入方式进行血栓评价,针对支架植入时、短期及长期植入后血栓形成等与已上市金属支架进行了比较性研究。其评价方法包括大体观察、数字血管造影术中分析、光学干涉成像技术分析、扫描电镜等。利用以上各种评价方法的优势,本研究实现了对此类血管内器械在考虑其降解过程中血栓形成的综合评价。结果说明,对可降解血管内植入器械的体内血栓形成评价,需考虑植入手术及术后与其体内变化过程相关的两个阶段,并充分利用各种评价手段的优势,并且适宜的已上市对照样品的选择也甚为重要。本研究力图通过实例提供新型可降解类血管支架可行的体内血栓评价方案,解决其临床前评价过程中的有关方法学问题,并为类似产品的评价方案设计提供参考。

摘要：改善电能质量的前提是获得电能质量准确的实时信息。为了实现更准确地实时监测电能质量各项指标,本文以Lab VIEW图形化软件为开发平台,设计了电能质量实时监测与分析系统,采用广义S变换和分类规则树相结合的方法实现暂态电能质量扰动信号时间定位和自动识别。该系统主要包括参数设置、数据采集与分析、录波存储和数据传输4个功能模块,具有实时监测稳态电能质量的各项指标和记录暂态扰动的发生时刻和分析识别功能。通过三相可编程交流电源模拟各项电能质量信号,对该系统测量功能进行实验验证,结果表明:电压有效值误差小于0.5%,频率误差小于0.01 Hz,各次谐波电压误差小于5%,电压中断和暂态振荡扰动信号的检测值存在误差,但误差都在1 ms之内,验证了该系统的正确性和有效性。该系统在功能上能完全满足电能质量监测分析的应用要求,可为改善电能质量和制定有关电能质量治理措施提供必要的数据支持,具有良好的实际应用意义。

摘要：目的采用不同植入剂量,对羧甲基壳聚糖(CMC)水凝胶亚慢性全身毒性试验剂量的选择进行探讨。方法设置5 ml/kg和50 ml/kg的植入剂量,综合临床观察、血液学、临床生化、大体尸检和组织病理学检查结果,对CMC水凝胶亚慢性全身毒性进行比较研究。结果植入剂量为50 ml/kg时,实验动物初期皮肤刺激损伤明显,试验终期临床生化指标及组织病理指标提示受试物在该剂量条件下有潜在的亚慢性全身毒性。而植入剂量为5 ml/kg时未见明显的亚慢性全身毒性。结论生物材料器械亚慢性毒性评价应遵循个体化原则,根据产品的预期使用目的、使用方式、临床最大使用剂量及前期的研究资料,在动物可耐受的情况下,设计科学合理的试验方案对其进行全面评价。

摘要：针对国家标准中量化的电压偏差、频率偏差、三相不平衡度、谐波、电压波动与闪变等稳态电能质量指标,探讨了检测电能质量的必要性,介绍了各指标的计算方法,设计并实现了电能质量在线监测系统,对电能质量的各项指标进行了监测。该系统基于虚拟仪器软件Lab VIEW编制检测程序,采用数据采集卡采集电网上的电信号,通过软硬件结合方法,实现快速、在线、准确测量各项电力参数,实时分析电能质量,实现各稳态电能质量指标的实时检测。模拟波形的试验检测结果显示,电压有效值误差小于0.5%,频率误差小于0.01 Hz,各次谐波电压误差小于5%,其结果误差满足国家标准,验证了该系统正确性和有效性。与传统的电能质量分析仪器相比,该系统具有所需硬件少、操作简单、开发周期短、扩展灵活、处理能力强等优点,其采集精度和速度、系统存储容量等方面均可满足现代电网研究的要求,具有一定的使用和推广价值。