摘要：目的:设计以PD-1基因为靶点的短发夹状RNA(shRNA),构建重组慢病毒载体,鉴定此RNA干扰系列对PD-1基因表达的影响,从设计序列中筛选高(>90%)干扰效率的靶点序列(PD694/791)。方法:设计合成3种PD-1的shRNA干扰序列,与LV3载体连接,进行阳性鉴定,通过免疫印迹法(western)和阳性细胞数量检测筛选高干扰效率靶序列。结果:基于转染目的细胞的PD-1蛋白western检测结果,计算三种shRNA慢病毒载体的干扰效率分别为:PD791干扰效率为78%、PD 238干扰效率为8%、PD 694干扰效率88%。结论:成功构建靶向PD-1的shRNA慢病毒载体,其中干涉片段PD694和PD791对PD-1的干涉抑制效果显著,可以有效抑制原代T细胞PD-1表达,为研究开发PD-1抑制剂治疗肿瘤奠定基础。

摘要：目的:利用RNAi技术构建靶向抑制肿瘤细胞PD-L1表达的shRNA慢病毒干扰载体,用于解除肿瘤细胞的免疫逃逸机制。方法:利用Designer3.0(Genepharma)软件以PD-L1为靶点设计4种shRNA基因序列,将shRNA序列插入到慢病毒载体中,连接产物转化后在选择性培养基上筛选阳性菌落并提取重组质粒,进行双酶切及测序鉴定,荧光显微镜观察慢病毒转染效果,westernblot对目的基因PD-L1四个靶点筛选获得PD-L1蛋白表达并计算出重组慢病毒的干扰效率。结果:限制性核酸内切酶Xba I和Nhe I双切鉴定结果皆为1000 bp大小的阳性重组载体;测序结果与shRNA模版一致;荧光显微镜观察结果显示慢病毒转染效果较好;western blot结果显示SH1、SH4组PD-L1表达无抑制,SH2、SH3组PD-L1表达有抑制;SH1组干扰效率19.75%,SH2组干扰效率32.10%,SH3组干扰效率40.74%,SH4组干扰效率7.41%。讨论:SH3组重组慢病毒对PD-L1表达有抑制作用且干扰效率最高,成功构建了一款靶向肿瘤细胞PD-L1的shRNA慢病毒干扰载体,为利用RNAi技术干扰PD-L1靶点的肿瘤免疫治疗奠定了实验基础。

摘要：文章介绍站场设计中需要注意的轨面顺坡问题,提出了在允许条件下采用内移警冲标、信号机、选择合理横坡断面解决轨面顺坡;阐述曲线限界变加宽的存在,并提出简化应用的方法。

摘要：介绍兰新线百里风区历年来大风灾害及防风措施,阐述利用路堑及挡风墙防风的有效性,利用试验数据及成果说明百里风区双线铁路修建一侧挡风墙能够确保列车在一定风力条件下安全通行。

摘要：从目前论证的三峡工程水电机组选型及主要参数来分析,三峡电站选用的设计水头偏低,单机出力限制了高水头运行区机组效率。本文探讨了减少上游低水位运行时间,增加平均水头和装机容量的意义和可能性,以利更充分地利用长江的水力资源,取得更好的效益。

摘要：本文介绍了4K超高清图像的特点和测试图像的场景设计,对拍摄设备选型、HDR高动态范围格式、拍摄制作过程中的技术控制以及HDR图像制作中的检测方法进行了详细说明。

摘要：介绍线间距变更的一般方法,阐述变更线间距地段第二线曲线半径的确定方法、缓和曲线线间距检查值的确定方法,变更线间距曲线合理的偏角以及大偏角存在的问题,提出采用经济比较法和不等长缓和曲线法解决线间距过大问题。

摘要：本文主要是针对系统设计的不合理性,导致供热时达不到设计热负荷,同时在运行中发现小的系统方面也存在不足,为此提出了可靠的技改方案,并付诸实施,保证了热网的安全、稳定、经济运行。

摘要：核磁共振兼容手术机器人的驱动问题是研究图像导航手术机器人的一个重要内容。首先分析了核磁共振兼容手术机器人存在的问题,介绍了国内外研究者关于核磁共振兼容手术机器人驱动方式的使用情况,探讨了各种驱动方式的特点,得出了各项驱动方式在核磁共振环境下的使用性能,并对其发展方向作出了展望。

摘要：龙角山水库灌区位于胶东半岛乳山市西部丘陵区,设有四条干渠,干渠总长达64.8km,设计灌溉面积0.89万hm^2,占全市有效灌溉面积的1/3,多年来灌区为这一山东省粮食生产基地县的农业稳产高产,推动当地农村经济发展发挥了重要作用。 该灌区自1965年开发兴建以来已有33年的历史,工程由于多年运行老化、破坏严重。