摘要：[目的]利用CRISPR/Cas9技术构建YBX1基因截短的SHH型髓母细胞瘤DAOY细胞系,探讨截短的YBX1对DAOY细胞迁移和干性增殖的影响。[方法]设计针对YBX1基因的sgRNA序列,并将其插入pX330载体构建sgYBX1表达质粒。DAOY细胞经pX330-sgYBX1和耐青霉素质粒转染,药筛后采用极限稀释法挑取单克隆细胞系,使用测序及蛋白质印迹技术检测YBX1基因编辑的情况,利用免疫荧光实验检测YBX1截短体在DAOY细胞内的定位情况,并通过CCK8、Transwell、克隆形成实验、低黏附板成球实验检测YBX1截短体对DAOY细胞增殖、迁移及干性的影响。[结果]测序结果表明,在DAOYYBX1-trunc细胞系中,YBX1基因编码区缺失144个碱基,导致合成肽段的第21~68氨基酸(位于A/P domain和CSD结构域)缺失。免疫荧光实验结果表明截短的YBX1蛋白定位富集在细胞核内。与未编辑细胞相比,DAOYYBX1-trunc细胞的增殖能力基本不变,但迁移能力减弱了50%,克隆形成能力削减了54%,细胞成球能力削减了68%。[结论]成功构建YBX1蛋白在21~68氨基酸截短的DAOY细胞系,其削弱了DAOY细胞的迁移及干性增殖能力。

摘要：1.《疯狂足球赛》足球是世界第一大运动,也是各个国家非常重视的一项体育运动,是一项广泛普及的运动,是参与人数最多的运动之一,也是孩子们非常喜爱的运动。此幅作品定格在赛场上运动员们激烈争夺的瞬间,一脚出其不意强有力的射门,机智的守门员腾空跃起迅速抓球,双方队员在激烈的争抢中由于身体的接触双双倒地。作品所描绘的人物造型生动、动态夸张,画面采用油水分离的技法所出现的肌理效果,产生了不一样的趣味。

摘要：海上风电机组的腐蚀与防护问题是海上风电发展的难点之一。针对海上风电的腐蚀现状进行了分析,阐述了海上风电机组结构与海洋腐蚀环境的关系,阐述了风电机组部件腐蚀特征和腐蚀类型,从腐蚀防护和腐蚀监检测2个方面应对海上风电腐蚀问题。在海上风电防腐方面,提出了海上风电腐蚀控制设计准则、标准要求和控制方法。海上风电腐蚀监检测方面,介绍了腐蚀检测技术和监测技术,着重阐述了风电在线腐蚀监测技术的主要构成和基本原则,最后并对未来的腐蚀在线监测工作进行了展望。