摘要：目的:构建实时荧光PCR法以测定人类双埃可病毒RNA。方法:通过相关资料自行设计合成人类双埃可病毒引物,将病毒RNA进行反转录之后,进行基于EVaGreen染料的实时荧光定量(Real-time)PCR扩增,通过高分辨率溶解曲线、核酸电泳及产物测序验证PCR结果。结果:对该病毒保守区约260BP片段扩增成功,测序证实为人双埃可病毒序列,建立了该病毒EVaGreen实时荧光PCR检测方法。结论:为人类双埃可病毒的检测提供了一种快速简便的方法。

摘要：目的了解近年引起食物中毒的26株副溶性弧菌分离株的携带主要毒力基因的分子流行病学特征和耐药性状况,为制定相应的防控措施提供参考。方法根据副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)和耐热相关溶血素(TRH)基因序列设计PCR引物,建立PCR反应体系,检测26株从2005年11月至2008年8月发生的8起散发性食物中毒事件中分离的副溶血性弧菌菌株的毒力基因TDH和TRH,K-B法测定其药物敏感性。结果26株副溶血性弧菌有23株携带有TDH基因,阳性率为88%,所有菌株均未带有TRH基因;26株菌对亚胺培南、阿米卡星、头孢吡肟、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、哌拉西林、头孢哌酮、头孢他啶、头孢西丁等13种药物未见有耐药菌株;但对磺胺异恶唑、替卡西林、氨苄西林等有较高的耐药率,分别达76.9%、69.2%、80.8%。而对复方新诺明、四环素、头孢呋辛酯、头孢噻吩、头孢唑啉等也有耐药菌株的存在。结论带有TDH基因是近年引起食物中毒的副溶性弧菌分离株的主要分子流行病学特征,所分离菌株对多种常用药物敏感性高。研究结果为评价引起食物中毒的副溶性弧菌的分子流行病学特征和制定可行的防控措施提供了科学依据。

摘要：目的建立快速检测葡萄球菌肠毒素C基因（staphylococcal enterotoxin C，SEC）PCR方法。方法根据SEC基因的序列，设计特异性PCR引物，建立扩增体系，琼脂糖凝胶电泳检测扩增的靶基因片段。通过分析产SEC菌株和对照菌株PCR产物，评价方法的特异性；通过对产SEC金黄色葡萄球菌定量样本系列稀释后进行PCR检测，分析方法的敏感性；并运用该方法分析实验室既往检出的30株金黄色葡萄球菌SEC基因的携带情况。结果建立了金黄色葡萄球菌SEC基因PCR快速检测方法，该法PCR扩增产物长度为490bp，未见假阳性结果，特异度良好；灵敏度较高，反应体系中有32cfu的产SEC金黄色葡萄球菌即可检出；30株本地分离的金黄色葡萄球菌SEC基因携带率20％。结论PCR法可以快速、敏感地检测SEC基因，是金黄色葡萄球菌食物中毒诊断可以利用的有效工具。