摘要：目的克隆结核分枝杆菌Rv3803c和Rv3846基因,并在大肠埃希菌(***)中进行表达和纯化。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增出Rv3803c和Rv3846基因片段,克隆至pGEX-6P-1表达载体中,测序正确后,在*** Rosetta中诱导表达,GST标签亲和层析法纯化蛋白,考马斯亮蓝染色及Western-blot分析鉴定。结果重组质粒pGEX-Rv3803c、pGEX-Rv3846测序表明核苷酸序列与设计完全一致。其在*** Rosetta中的存在形式均为可溶部分约50%、包涵体约50%,相对分子质量约为56 000和45 000,纯化的GST-Rv3803c、GST-Rv3846样品纯度90%以上。完整的GST-Rv3803c的浓度大约为0.1mg/ml,完整的GST-Rv3846的浓度大约为0.5mg/ml。即相当于每升*** Rosetta培养物中,GST-Rv3803c产量为:0.25mg/L、GST-Rv3846产量为1.25mg/L。结论成功获得了纯化蛋白Rv3803c(MPT51)和Rv3846(SodA),为进一步研究MPT-51和SodA蛋白的辅助诊断价值、构建保护性疫苗提供了实验依据。