摘要：我国现有的就地式馈线自动化方案主要针对馈线的单重故障,通过跳开故障点附近分段开关和隔离故障;闭合联络开关,以恢复健全线路的供电,减小停电范围。在联络开关闭合供电期间内,若他处发生故障,则现有的就地式馈线自动化功能由于只能静态识别分段开关与联络开关的属性,无法在开关属性变化后再次准确隔离故障。随着经济的发展,配电网络结构日益复杂,负载多样性逐渐增加,馈线发生多重故障的概率也日益升高。设计了一套采用动态判断联络开关的算法,改进了现有的馈线自动化功能,实现了对馈线多重故障准确定位、自动隔离。

摘要：目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体，转染293T细胞，建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeI酶切位点，使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列，对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeI内切酶消化后目的片段交换连接人pGC-FU载体，构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后，将质粒pGC-Fu-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞，荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果，重组质粒pGC-Fu-Shh的测序，Westernblotting验证Shh在转染293T细胞中表达。结果转染293T细胞后荧光显微镜，24h后观察到绿色荧光蛋白的表达，基本判断Shh表达，说明转染成功。重组质粒pGC-FU-Shh的测序Shh基因片段大小1386bp。通过Westernblotting检测转染293T的样品，可以观察到72～95KDa处条特征带与Sbh融合蛋白相吻合，判断Shh表达。通过PCR扩增获得了Shh基因，将Shh克隆到慢病毒转移质粒pC-C-FU中，并在293T细胞中包装产生慢病毒颗粒。结论成功构建了pGC-FU-Shh-GFP慢病毒过表达载体，获得了稳定转染的细胞株。