摘要：通过构建草莓不同发育时期果实的cDNA文库,筛选与促分裂原活化蛋白激酶FvM4K1互作的蛋白,探究FvM4K1参与调控果实发育的分子机理。以森林草莓(Fragraria vesca‘Hawaii 4’)为材料,提取不同发育时期果实的总RNA,建立cDNA文库,其库容为9.6×10^(6) CFU,重组率96%,插入片段平均长度大于1000 bp。同时构建诱饵载体pGBKT7-FvM4K1,并检测其在酵母中无自激活活性。利用共转化方法,从文库中筛选到13个与FvM4K1互作的蛋白。通过Gene Ontology(GO)通路注释表明候选互作蛋白主要集中在细胞代谢过程及具有催化活性的分子过程。候选蛋白预测功能主要集中在调控花粉发育和花粉管伸长以及开花时间等。筛选到的13个蛋白编码基因在果实发育过程中表达模式不同,其中4个蛋白预测功能与草莓果实发育密切相关。

摘要：为研究草莓FvMOB1基因参与生长素调控生长发育及细胞增殖过程中的作用,以森林草莓(Fragraria vesca)‘Hawaii 4’为材料,对同源基因FvMOB1A和FvMOB1B的编码区序列进行基因克隆,对基因进行生物信息分析。应用荧光定量PCR分析了FvMOB1在森林草莓不同器官、不同发育时期果实和IAA处理不同天数的幼苗中的相对表达量,对FvMOB1蛋白进行亚细胞定位和酵母双杂互作分析。结果表明,FvMOB1A和FvMOB1B的开放阅读框分别为648和651 bp,编码215个和216个氨基酸。在森林草莓中,FvMOB1A的表达量远远高于FvMOB1B,其中FvMOB1A在根和瘦果中表达量高,茎中最低,FvMOB1B在瘦果和茎中表达量相对较高,叶中最低;两个基因都在花后30 d(成熟后期)果实中表达最高;幼苗经IAA处理后两个基因的表达模式相同,表达量都显著上调并在7 d达到峰值。FvMOB1A和FvMOB1B蛋白定位在细胞核和细胞膜上,酵母双杂交验证二者均可与促分裂原活化蛋白激酶FvM4K1蛋白互作。