摘要：以长白山地区及韩国等9个采样点采集的软枣猕猴桃新鲜幼叶为试材,进行RAPD分子标记反应扩增体系的优化。对实验结果影响较大的5个因素(模板DNA浓度,引物浓度, MgCl_2浓度, dNTP浓度, Taq DNA聚合酶浓度)进行单因素设计,以寻找最佳反应浓度。结果表明,总反应体积为20μL时,模板DNA 40 ng、引物浓度0.3μmol/L、MgCl_2浓度2.0 mmol/L、dNTP浓度250μmol/L、Taq DNA聚合酶2.0 U。此时扩增条带多、电泳结果清晰稳定,表明该体系是一个适合软枣猕猴桃RAPD分子标记反应的体系。该体系的建立有利于软枣猕猴桃的亲缘关系和遗传多样性分析。

摘要：本研究以中国古老月季新鲜幼叶为试材,进行RAPD分子标记反应扩增体系的优化。对RAPD-PCR反应结果影响较大的五个因素(模板DNA的浓度,引物的浓度, Mg Cl2的浓度, dNTP的浓度, Taq DNA聚合酶的浓度)进行了单因素多水平设计。结果表明:20μL总反应体积中含模板DNA (10 ng/μL) 1.0μL、dNTP(2.5 mmol/L) 1.6μL、引物(2.0μmol/L) 1.5μL、Mg Cl2(25 mmol/L) 1.6μL、Taq DNA聚合酶(5 U/μL) 0.3μL、10×Buffer用量2.0μL,其余用去离子水补充。通过优化后的RAPD-PCR反应体系可获得清晰、稳定、条带多的电泳图,表明以上反应条件适合中国古老月季RAPD分子标记反应的体系。该体系的建立有利于中国古老月季的亲缘关系和遗传多样性分析。

摘要：桃品种以重阳红(花粉不育)×大久保(花粉可育)的52株F1代群体为试材,应用RAPD技术,结合集群分组分析法(Bulked Segregate Analysis,BSA)构建花粉可育/不育基因池,利用180个随机引物,筛选在花粉可育基因池中稳定扩增的一个RAPD标记OPW03-900。经过重复性验证和群体单株验证,该标记仅在花粉可育个体(重组型除去)中出现,与桃花粉可育/不育位点的连锁距离为5.80cM。将该特异性片段回收、克隆、测序,并设计一对特异SCAR引物,再对F1代个体进行PCR扩增,发现该特异带的位点及重组型个体的数目与RAPD扩增结果一致,片段大小为906bp,命名为SCW03-906,表明RAPD标记已成功转化为与桃花粉可育基因连锁的SCAR标记。该序列已被GenBank收录,登录号为DQ659676。

摘要：在载体yy449的CaMV 35S minimal启动子序列与LUC基因序列之间增加BglⅡ限制性内切酶位点,构建yy621载体。用PCR的方法分别扩增CaMV 35S minimal启动子序列与LUC基因。引物设计要满足如下条件:CaMV 35S minimal启动子序列扩增片段的上游应包括BamHⅠ、下游应包括BglⅡ限制性内切酶位点;LUC基因序列扩增片段的上游应包括BglⅡ、下游应包括XbaⅠ限制性内切酶位点。以上两个片段先用BglⅡ限制性内切酶消化后进行连接,得到CaMV 35S minimal启动子序列与LUC基因序列之间含BglⅡ限制性内切酶的识别位点的片段,然后再用BamHⅠ和XbaⅠ限制性内切酶进行消化,插入到载体yy449的BamHⅠ和XbaⅠ酶切位点之间,替换原有的CaMV 35S minimal启动子序列与LUC基因序列。经菌落筛选、PCR鉴定和测序验证,阳性菌落中的CaMV 35S minimal启动子序列与LUC基因序列之间包含BglⅡ限制性内切酶的识别位点,载体yy621构建成功。本实验中构建的荧光素酶表达载体yy621,适于今后用抗性相关基因替换LUC基因,测定合成启动子对抗性相关基因的具体调控与赋予植物对不良环境的具体抗性表现,或者用全长启动子序列替换CaMV 35S minimal启动子序列(-46~+1),对进一步观察LUC基因的表达调控具有重要的意义。

摘要：本文简要介绍了高效就业网站的设计思路、建设模式和总体结构,详细说明了网站主要部分的设计情况和主要功能,并对建设过程中运用的关键技术进行了较为深入的分析,同时探讨了高校就业网站发展的新思路。