摘要：为了建立快速检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)通用型及1型(BVDV-1)、2型(BVDV-2)的检测方法,并了解聊城地区BVDV的流行规律,试验根据BVDV-1、BVDV-2 5′端非编码区(5′UTR)基因序列分别设计BVDV通用型检测引物及BVDV-1、BVDV-2特异性检测引物,通过优化RT-PCR扩增条件分别建立BVDV通用型RT-PCR、BVDV-1分型RT-PCR、BVDV-2分型RT-PCR检测方法,并分析3种检测方法的特异性、重复性、符合性,最后采用3种检测方法对聊城地区采集的4 685份临床样品进行病原学检测分析。结果表明:3种检测方法检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛轮状病毒均为阴性,检测灵敏度分别为6.84,1.08,3.03 ng;BVDV通用型RT-PCR检测方法与BVDV-1分型RT-PCR、BVDV-2分型RT-PCR检测方法的符合率均为100%;聊城地区BVDV阳性率为6.51%,其中BVDV-1和BVDV-2阳性率分别为4.50%和2.01%,BVDV-1和BVDV-2混合感染率为0.13%。说明试验建立的BVDV通用型RT-PCR、BVDV-1分型RT-PCR、BVDV-2分型RT-PCR检测方法均具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性,聊城地区普遍存在BVDV的流行,其流行优势基因型为BVDV-1。