摘要：目的建立一种灵敏、特异的实时荧光定量TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),用于快速、准确地检测西藏环状病毒(Tibet orbivirus, TIBOV)。方法收集GenBank数据库中全部TIBOV基因序列,利用Clustal X 2.1软件进行比对,根据分析结果选择TIBOV VP4基因保守区域设计特异性引物、探针;以体外转录的RNA为标准品,建立检测TIBOV的TaqMan RT-PCR方法,绘制荧光定量标准曲线;对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评价。结果引物与探针具有良好的特异性,对多种虫媒病毒无交叉反应。检测反应灵敏度为1.0×10^(2)拷贝/反应,在1.0×10^(2~8)拷贝/反应模板范围内具有良好的扩增曲线,同一样品重复检测循环阈值(Ct)的变异系数均小于1.5%。对西藏自治区、云南省、湖南省和广东省采集的蚊虫样本进行筛查,结果均为阴性。TIBOV模拟样本检出率为100%。结论该方法灵敏度高、特异性强,可用于TIBOV的常规监测。

摘要：目的建立一种灵敏且特异的实时荧光定量RT-PCR方法,用于快速检测盖塔病毒(getah virus, GETV)。方法从GenBank数据库下载GETV基因序列,使用Clustal X完成序列比对,针对高保守区段设计特异性引物和探针;以GETV核酸为标准品建立标准曲线,分别对检测反应的灵敏度、特异性和稳定性进行评价。结果本方法能特异地检测GETV,与多种虫媒病毒无交叉反应;灵敏度为1.0×10 pfu/ml,批内和批间变异系数均小于1%。从湖南、河北、福建、重庆采集的196批蚊虫中检出1批GETV阳性。结论建立了灵敏度高,特异性强的TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR方法用于GETV筛查。

摘要：为了适应办公自动化系统的发展和中国办公流程特点,并将办公自动化系统中的公文流转功能设计为一个核心的工作流系统,根据办公环境中流程特点,基于一种工作流定义模型设计了工作流系统,并针对特殊工作流和工作流进化问题,提出了有效和易于实现的解决方案。通过将传统工作流系统和特殊工流系统相结合,实现了办公自动化系统中流程的灵活执行和管理。

摘要：背景:蝾螈具有很强的肢体再生能力,研究蝾螈肢体再生对于实现患者肢体再生有着重要的指导作用。目的:验证东方蝾螈的肢体再生能力,并通过诱导东方蝾螈异位肢体生成,建立东方蝾螈为模式动物的再生医学研究技术平台。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-07/2009-01在西北大学教育部西部资源与现代生物技术重点实验室完成。材料:东方蝾螈,购买于西安宠物市场。方法:①将成体东方蝾螈右前肢上臂处切断,连续10周观察记录其断肢再生情况,并分别取材进行组织学观察。②通过东方蝾螈前肢运动神经异位转移和对侧皮肤移植,观察肢体异位再生情况。主要观察指标:①观察东方蝾螈肢体再生能力和组织学过程。②观察东方蝾螈的异位肢体诱导情况,并进行组织学观察。结果:①东方蝾螈断肢后10周左右肢体成功再生。肢体再生过程中,肢芽中出现大量皮肤成纤维细胞。②通过神经异位转移和对侧皮肤移植,可以诱导出肢芽。约13周可以成功在异位诱导出新的肢体。结论:①东方蝾螈具有完全肢体再生能力,皮肤成纤维细胞是参与肢体再生的重要细胞来源。②神经异位转移和对侧皮肤移植可以在异位诱导出新的肢体。

摘要：背景:细胞干燥保存的研究报道较多,组织器官是否适用于干燥保存,尚缺乏证据。目的:用海藻糖作为干燥保护剂,优化海藻糖载入大鼠皮肤的条件,探索皮肤干燥保存的可行性。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-11/2008-11在西北大学生命科学学院组织工程实验室完成。材料:体质量150g左右成年SD大鼠。海藻糖由Sigma公司提供。方法:通过控制海藻糖浓度(50,300,500,800,1000mmol/L)、负载时间(0.5,4,7,9h)和温度[4℃、4～37℃(相转变)和37℃],优化海藻糖导入大鼠皮肤的条件。将负载海藻糖的皮肤置于含100g/L二甲基亚砜的DMEM冷冻液中孵育,程序冷冻仪以1℃/min的速率降温至-80℃后移入冷冻干燥机中进行冻干。将冻干皮肤水化复苏后分别用双醋酸羧基荧光素(CFDA)、四甲基偶氮唑盐(MTT)检测皮肤活性,并以新鲜和甲醛固定皮肤的吸光度值作为阳性和阴性对照。以苏木精-伊红染色和观察皮肤组织结构,并进行自体移植。主要观察指标:海藻糖在不同加载浓度、孵育温度和时间载入大鼠皮肤的情况。冻干皮肤水化后的形态学、组织学变化及其自体移植后存活情况。结果:海藻糖浓度小于800mmol/L,皮肤的海藻糖载入量随海藻糖浓度的升高而明显增(P<0.05),浓度大于800mmol/L,海藻糖载入量差异不显著。孵育温度为37℃组和相转变组皮肤海藻糖载入量明显高于4℃组(P<0.05),相转变组与37℃组差异无统计学意义。皮肤孵育4,7,9h的海藻糖载入量明显高于孵育0.5h的载入量(P<0.05),孵育时间为4,7,9h之间的海藻糖载入量差异不显著,但孵育7h后皮肤的海藻糖载入量不再增加。实验以海藻糖浓度为800mmol/L,孵育温度为37℃,孵育时间为7h为优化的负载条件处理大鼠皮肤。冻干皮肤玻璃化状态良好,呈半透明状。水化后能够恢复到新鲜皮肤的大小和色泽,组织结构和细胞形态与新鲜皮肤组织无差别。冷冻干燥皮肤的活性明显高于甲醛固定的大鼠皮肤(P<0.05)。冻干保存的皮肤水化后移植回自体大鼠,可存活长达13d。结论:海藻糖可作为干燥保护剂进行大鼠皮肤冷冻干燥保存,海藻糖浓度为800mmol/L,孵育温度为37℃,孵育时间为7h是海藻糖载入大鼠皮肤的最佳条件。

摘要：目的利用荧光粉光致发光的原理,研制一种适合在暗环境下穿刺的荧光静脉留置针。方法选择发光效率高、无毒、无放射性及组织相容性好的荧光材料及临床应用的留置针,进行整体建模设计,研发荧光静脉留置针的实物产品。结果完成荧光静脉留置针整体设计,制作了荧光静脉留置针的模型和实物产品。结论荧光静脉留置针的成功研发为野战环境下的静脉穿刺提供了保障。