摘要：背景:有研究建议枢椎椎弓根螺钉置入前必须进行CT多平面重建,以确定每个患者C2椎弓根的解剖结构,并设计合适的螺钉轨迹和直径,评估置钉的可行性,以降低手术相关并发症的发生。目的:利用CT多平面重建技术对枢椎椎弓根峡部复合体最狭部进行形态学分型,用于评估枢椎椎弓根螺钉置入的可行性。方法:通过西门子***软件CT多平面重建功能,对200例患者(400枚枢椎椎弓根)的颈椎CT数据进行回顾性研究。依据椎弓根轴线方向调整CT多平面重建定位线,重建出椎弓根峡部复合体最狭部的切面断层图像,根据其形态特点将椎弓根峡部复合体最狭部分为3型:1型,“钩”型,其中1a型外径宽度(a1)>0.4 cm,1b型外径宽度(a1)≤0.4 cm;2型,“类圆/椭圆”型;3型,“横椭圆”型,比较3种分型椎弓根峡部复合体最狭部的外径宽度(a1)、髓腔宽度(a2)、外径高度(d1)、髓腔高度(d2),评估3种分型椎弓根螺钉的置钉可行性。结果与结论:①400枚枢椎椎弓根中1型269枚,2型130枚,3型仅1枚。②1型,2型平均外径高度比较差异无显著性意义(P>0.05),平均髓腔高度、平均外径宽度及平均髓腔宽度差异均有显著性意义(P<0.001);1型,2型平均外径宽度≤0.4 cm数量占比分别为42例(15.6%)、0例(0.00%),差异有显著性意义(P<0.001);第3型仅1例,外径高度、髓腔高度、外径宽度、髓腔宽度分别为1.20 cm、0.84 cm、0.64 cm、0.31 cm。③结果提示,1a型、2型和3型患者可安全置入枢椎椎弓根螺钉,无需进一步测量评估;1b型患者慎行椎弓根螺钉置入术,因此对于1型需要进一步测量椎弓根峡部复合体最狭部外径宽度,以评估枢椎椎弓根螺钉的置钉可行性。

摘要：为了解决特厚煤层分层开采底分层沿空留巷瓦斯超限问题,采用柔模混凝土沿空留巷技术,在白芨沟煤矿010202工作面进行了特厚煤层分层开采沿空留巷应用,重点研究了巷道副帮小煤柱加固方案、特厚煤层分层开采双柔模墙沿空留巷设计方案。应用结果表明:在厚煤层底分层工作面实施双柔模墙开采技术后,现场留巷巷道顶底板形变量减小,巷道采空区侧顶板维护较好,顶板钢梁形变量小,整体留巷效果好,留巷巷道解决了下区段4个分层回采瓦斯超限问题,提高了煤炭采出率,对厚煤层及特厚煤层分层开采沿空留巷技术有良好的经济效益和应用前景。

摘要：目的研究靶向趋化因子受体CCR7的反义肽核酸(PNA)对树突状细胞(DC)CCR7蛋白表达及凋亡的影响,并探讨其凋亡机制。方法体外培养大鼠骨髓来源的DC,脂多糖(LPS)诱导成熟。设计靶向CCR7 mRNA翻译起始区的反义PNA,以随机PNA和空白组为对照处理体外培养7d的未成熟DC,脂多糖诱导48h后收集成熟DC,免疫细胞化学染色法检测CCR7蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测磷酸化Akt和Akt蛋白表达。应用渥曼青霉素(wortmannin)抑制磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt信号通路进一步观察磷酸化Akt蛋白表达和细胞凋亡率的变化。结果反义PNA组DC CCR7蛋白表达明显低于随机PNA组和空白组,而细胞凋亡率却明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),Western blot检测显示反义PNA组Akt蛋白磷酸化水平明显低于随机PNA组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。DC经PI3K抑制剂预处理后,CCR7介导的Akt蛋白磷酸化及抗凋亡作用被阻断。结论CCR7反义PNA能够有效抑制体外培养的大鼠DC趋化因子受体CCR7的表达并导致其发生凋亡,其机制可能是阻断了CCR7介导P13K/Akt信号转导通路的活化。

摘要：目的研究反义肽核酸（PNA）下调树突状细胞（DC）趋化因子受体CCR7基因表达在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法体外培养大鼠骨髓来源的DC，设计靶向CCR7mRNA翻译起始区的反义PNA组，以随机PNA组和空白组为对照。免疫细胞化学染色法检测反义PNA对CCR7蛋白表达的影响；趋化试验检测DC的趋化活性。建立大鼠肝移植排斥反应模型，在供肝冷保存和肝移植术后应用反义PNA，以随机PNA组和空白组为对照，观察术后受者存活时间。于术后第7、10天取移植物标本观察肝脏病理学改变；免疫组织化学染色法检测淋巴结DC数量变化以及T淋巴细胞的活化增殖情况。结果反义PNA显著下调体外培养的DC表达CCR7蛋白，DC体外趋化活性受到明显抑制，与随机PNA组和空白组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。肝移植术后，反义PNA组与随机PNA组和空白组相比，受者腹腔淋巴结中DC数量明显减少，T淋巴细胞活化增殖受到显著抑制，受者术后存活时间明显延长（P〈0．05）。结论通过反义PNA下调CCR7基因表达，阻断DC迁移和抗原提呈，能有效抑制急性排斥反应，延长受者存活时间。

摘要：本文提出利用建筑信息模型对异形空间的空调负荷进行分析计算,介绍了应用建筑信息模型(BIM)计算空调负荷的方法,并和传统空调负荷计算方法做了对比。对上海某世博展览厅的空调负荷计算结果分析表明,建筑信息模型的应用是可行的。

摘要：目的研究人CCR4-NOT转录复合体亚基7 (CNOT7)基因敲减对肝母细胞瘤细胞系HepG2免疫微环境的影响并探讨其意义。方法设计细胞转染方案,将实验分为3组:靶向敲减CNOT7组、阴性对照组和过表达CNOT7组,获得各组细胞后,用倒置荧光显微镜观察细胞转染效率。Western blotting方法检测CNOT7、转化生长因子-β1 (TGF-β1)及核转录因子-κB (NF-κB) p65蛋白的表达水平,ELISA法测定细胞培养上清液中TGF-β1水平。流式细胞术检测转染后肿瘤细胞对自然杀伤(NK)细胞杀伤功能的敏感性。结果与阴性对照组相比,靶向敲减CNOT7组TGF-β1和NF-κB p65蛋白表达水平显著降低,过表达CNOT7组TGF-β1和NF-κB p65蛋白表达水平显著升高;靶向敲减CNOT7组细胞培养上清液中TGF-β1水平显著降低,过表达CNOT7组TGF-β1水平显著升高;NK细胞与肿瘤细胞共培养,靶向敲减CNOT7组细胞凋亡率显著升高,过表达CNOT7组细胞凋亡率显著降低。结论CNOT7基因参与肝细胞癌免疫微环境的形成,靶向敲减CNOT7基因可减少TGF-β1分泌,增强NK细胞对肝癌细胞的杀伤功能。

摘要：目的克隆Nucleophosmin(NPM)的编码序列,构建含Nucleophosmin基因的真核细胞表达载体并在肝癌细胞系HepG2中表达,为进一步研究该基因在肝癌多药耐药中的作用奠定基础。方法根据已发表的Nucleophosmin基因的核苷酸序列设计合成一对引物,以人乳腺癌组织抽提的RNA为模板进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增产物用BamHI和XhoI双酶酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pEGFP-N1中,用限制性内切酶酶切重组质粒pEGFP/NPM和DNA序列测定进行鉴定。用脂质体法将pEGFP/NPM导入肝癌细胞系HepG2中,G418选择培养,经免疫组织化学法和RT-PCR鉴定其表达。结果 RT-PCR扩增出长894bp的特异性片段,经克隆至pEGFP-N1后酶切鉴定证实,并测序表明序列与GenBank报道完全一致。pEGFP/NPM在HepG2细胞中有稳定表达。结论成功克隆了NPM的编码序列,构建了其真核细胞表达载体pEGFP/NPM/1,有助于对NPM基因在肝癌多药耐药中的机制做进一步研究。

摘要：目的探讨靶向趋化因子受体CCR7的反义肽核酸(PNA)对树突细胞(DCs)CCR7的表达及趋化活性的影响。方法体外培养大鼠骨髓来源DCs,设计靶向CCR7mRNA翻译起始区的反义PNA,以随机PNA、空白组为对照处理体外培养7d的DCs,分别于24h,48h,72h后收集细胞,利用Western-blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测反义PNA对CCR7分子表达的影响,通过趋化实验检测DCs的趋化活性。结果DCs经PNA处理后24h,各组DCs其CCR7表达无明显差别,在48h,Western-blot检测显示反义PNA组CCR7蛋白表达明显低于对照组,而RT-PCR检测在mRNA水平却无明显差别。在72h,反义PNA组CCR7的表达在不同水平均明显低于对照组。经趋化实验证实,在48h以后反义PNA组DCs趋化活性受到明显抑制(P<0.05)。结论CCR7反义PNA能够有效抑制体外培养的大鼠树突细胞趋化因子受体CCR7的表达及其趋化活性,为进一步研究体内应用反义PNA抑制DCs的定向迁移和抗原递呈,调节免疫反应和诱导免疫耐受提供了新的策略。