摘要：结合实例说明巧用生物学实验促进初中学生科学思维发展的4种策略:一是整合实验,培养学生联系的思维;二是学生设计并实施实验,提高分析思维能力;三是利用定量实验,激发创新思维;四是创设与生活有关的探究实验,发展判断思维。

摘要：目的从双齿围沙蚕消化道中克隆并表达具有纤维蛋白溶解活性的蛋白。方法提取沙蚕消化道上皮细胞RNA,逆转录获得cDNA。根据丝氨酸蛋白酶家族基因保守序列设计兼并引物,筛选包含丝氨酸蛋白家族保守位点的阳性克隆,进行核苷酸测序。根据该序列利用5′RACE技术进行扩增,将获得的基因片段克隆到pMAL-p2载体中,在大肠杆菌BL21中进行融合表达。表达的融合蛋白经过直链淀粉树脂亲和色谱和DEAE-Sepharose 4B纯化后,纤维蛋白平板法检测其溶栓活性。结果cDNA经5′RACE扩增获得长度为260 bp的基因片段,推测其包含可编码83个氨基酸的完整序列(约9.0×103);重组pMAL-p2表达出51.0×103的融合蛋白,经过测定具有明显的溶栓活性。结论从双齿围沙蚕中克隆获得的基因片段表达的融合蛋白具有溶栓活性,有望成为一种新型的纤溶药物。

摘要：①目的　构建基因变构IL 2 (88ArgIL 2 )的重组克隆。②方法　将正常人的扁桃体细胞经PHA刺激后 ,获得cDNA文库 ,并以此为模板 ,经套式PCR扩增得IL 2的基因编码序列。测序确认正确后 ,设计含有突变位点的引物 ,经PCR定点诱变技术获得变构IL 2克隆并进行序列测定。③结果　IL 2基因定点诱变成功 ,并获得了基因变构IL 2重组克隆。④结论　IL 2重组基因变构克隆的构建为进一步在原核和真核细胞中表达以及研究制备低毒、高效的新型基因变构IL

摘要：①目的　从海洋生物双齿围沙蚕消化道上皮细胞中获得编码丝氨酸内肽酶某一功能基因的克隆。②方法　以丝氨酸内肽酶高度保守位点设计引物 ,利用 5′cDNA末端快速扩增 (5′RACE)和 3′RACE的方法 ,分别获得该保守位点前后的片段 ,克隆、测序。③结果　获得一条长度为 5 12bp编码丝氨酸内肽酶相关基因的序列。

摘要：①目的　利用基因工程技术从人扁桃体细胞cDNA中克隆出白细胞介素 2 1(IL 2 1)的编码基因 ,并在大肠杆菌中进行表达。②方法　以人扁桃体细胞经PHA刺激的cDNA文库为模板 ,经PCR获得IL 2 1的全基因片段。测序确认后 ,分别设计含BamHⅠ和SalⅠ酶切位点的引物 ,经PCR获得IL 2 1成熟肽的编码基因。将此IL 2 1基因插入表达载体 pGEX4T 2 ,重组克隆经酶切与测序确认后转化大肠杆菌DH5α进行IPTG诱导表达。 ③结果　琼脂糖凝胶电泳显示重组质粒的PCR和双酶切产物与理论值的大小相等。SDS PAGE显示经IPTG诱导后的大肠杆菌DH5α亦表达一与理论相符的条带。目的蛋白约占总菌体蛋白的 10 %。④结论　成功地构建了IL 2