摘要：目的应用实时荧光PCR方法检测呼吸道合胞病毒,分析2009—2010年广州地区儿童感染呼吸道合胞病毒的状况。方法以呼吸道合胞病毒的N基因序列为参考,设计特异性引物和TaqMan荧光探针,建立实时荧光PCR方法,进行灵敏度和特异性检测。采用实时荧光PCR方法,对2009—2010年门诊或住院部急性呼吸道感染患儿的21 458份咽拭子样本进行检测。结果 (1)实时荧光PCR方法具有较好的特异性和灵敏度,与其他常见呼吸道病毒无交叉反应。(2)2009年的10 477例临床标本中实时荧光PCR方法检测全年的呼吸道合胞病毒阳性率为7.25%,流行高峰在3月份,感染率为20.04%;2010年检测的10 981例临床标本中,呼吸道合胞病毒阳性率为9.73%,有两个流行高峰,分别为2月份(29.56%)和12月份(22.20%)。小于6个月的婴儿感染率最高。结论实时荧光PCR方法具有简便快捷、特异、敏感的特点,适用于临床呼吸道合胞病毒的检测。2009—2010年呼吸道合胞病毒依然是广州地区儿童急性呼吸道感染的主要病原。

摘要：目的了解广州地区2008年5—6月份手口足病的病原。方法设计肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒属通用实时荧光RT—PCR引物和TaqMan探针，运用TaqMan实时荧光***技术，对2008年5至6月，到广州市儿童医院就诊的疑似手足121病患儿咽拭子标本1023例（份），同时分别进行肠道病毒属、肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型检测。对肠道病毒属荧光RT—PCR检测阳性，而肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型荧光RT—PCR检测阴性的标本进行5’非编码区（Untranslated RegionUTR）的扩增和序列测定。结果在1023份临床标本中，肠道病毒属阳性434例，检出率为42．42％。其中，肠道病毒71型276例，柯萨奇病毒A16型126例，肠道病毒84型4份，埃可病毒11型3例，埃可病毒9型2例，柯萨奇病毒B3型3例，柯萨奇病毒A10型4例，柯萨奇病毒A6型3例，柯萨奇病毒A12或A5型6例，另有7例难以区分型别，没有混合感染。结论2008年5—6月广州地区手足口病的主要病原是肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型，并有肠道病毒84型、柯萨奇病毒A10型、柯萨奇病毒A12型、柯萨奇病毒A6型、柯萨奇病毒B3型、埃可病毒11型、埃可病毒9型等小部分其他型别肠道病毒感染。