摘要：1 临床资料患者男,46岁,面部、颈部、胸背部丘疹30年。患者30年前无明显诱因面颈部出现散在的针尖至米粒大小的肤色或棕红色丘疹,无痛痒症状,曾到多家医院就诊,效果不明显。患者自诉皮疹夏季加重,冬季略有好转。患者既往体健,无药物过敏史,父母非近亲结婚,无家族史。

摘要：目的探讨肝素酶(heparanase,HPA)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在进行期寻常型银屑病患者皮损中的表达水平及意义。方法选取嘉兴市第一医院皮肤科门诊2015年1月-2016年12月收治的进行期寻常型银屑病患者25例。采用免疫组化S-P法检测25例进行期寻常型银屑病患者皮损标本和20例对照组健康皮肤标本的HPA和VEGF水平并进行比较。结果HPA表达产物主要位于细胞浆,呈棕黄色颗粒状,银屑病组表达集中于棘层、基底层与乳头层血管内皮细胞,对照组呈阴性表达。VEGF表达产物主要位于细胞浆,呈棕黄色颗粒状,银屑病组表达集中于棘层与乳头层血管内皮细胞,基底层也有少量表达,对照组呈阴性表达或基底层少量表达。对照组HPA和VEGF表达阳性率分别为0%、5%,银屑病组HPA和VEGF表达阳性率分别为88%、96%,银屑病组HPA和VEGF表达阳性率均显著高于对照组(均P<0.05)。银屑病皮损中HPA和VEGF的表达呈正相关(r=0.585,P<0.05)。结论HPA和VEGF在进行期寻常型银屑病皮损中的表达水平明显高于正常皮肤,二者在银屑病发病机制中起到重要作用,可作为进行期寻常型银屑病病理诊断的辅助指标之一。

摘要：目的 探讨c-Jun激活区结合蛋白1（Jab1）在结直肠癌发生发展中的作用及其与结直肠癌临床病理特征的关系.方法 回顾性收集嘉兴市第一医院2007年1月至2008年12月行手术切除的80例结直肠癌组织标本,采用免疫组织化学EnVision二步法检测结直肠癌及其相应癌旁正常组织中Jab1的表达情况并分析其与临床病理特征的关系;提取6例新鲜结直肠癌手术标本的总蛋白并进行定量,通过蛋白质印迹检测结直肠癌组织与癌旁正常组织中Jab1的表达.结果 免疫组织化学及蛋白质印迹结果均显示,Jab1在结直肠癌组织中的表达显著高于在癌旁正常组织中的表达,结直肠癌组织中Jab1阳性表达率为96.3％ （77/80）,高表达者66例（82.5％）,低表达者14例（17.5％）;而癌旁组织中Jab1阳性表达率为8.8％ （7/80）,与结直肠癌组织之间差异有统计学意义（P ＜0.05）;Jab1阳性表达与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、TNM分期和淋巴结转移情况有关（均P＜0.05）;Jab1阳性表达与增殖指标Ki-67表达呈显著正相关（r=0.548,P＜0.01）,与p27kip1表达呈显著负相关（r=-0.461,P＜0.01）.结论 Jab1异常表达可能参与了结直肠癌的发生发展并与p27kip1负相关.Jab1有望成为评价结直肠癌恶性程度和判断预后的重要参考指标.

摘要：目的 探讨乳腺癌中Ki-67免疫组化检测过程中主要影响因素对其染色结果的影响。方法 收集60例癌灶直径≥2.5cm的乳腺癌新鲜手术标本,制作组织芯片,采用免疫组化两步法染色和图像分析,比较不同影响因素下乳腺癌Ki-67阳性细胞百分数的变化。结果 不同冷缺血时间（0.5、1、3和6h）分组的Ki-67增殖指数差异无统计学意义（χ^2=5.536,P=0.136）。不同固定时间分组（3、12、24、48和96h）Ki-67增殖指数均值分别为20.58%、26.84%、28.93%、29.91%和27.91%,差异有统计学意义（χ^2=13.837,P=0.008）。抗原修复法分组中,微波pH6.0的柠檬酸缓冲液组、微波pH9.0的EDTA缓冲液组、高压pH6.0的柠檬酸缓冲液组和高压pH9.0的EDTA缓冲液组Ki-67增殖指数均值分别为22.66%、28.93%、26.72%和32.62%,差异有统计学意义（χ^2=17.967,P=0.000）。一抗克隆号分组中,MIB1、SP6、7B11和EP54组Ki-67增殖指数均值分别为28.93%、32.88%、24.98%和20.47%,差异有统计学意义（χ^2=15.755,P=0.001）。二抗显色系统EnVision、PV8000和MaxVision组的Ki-67增殖指数差异无统计学意义（χ^2=0.332,P=0.847）。结论 乳腺癌中Ki-67免疫组化染色结果对于6h以内标本冷缺血时间和较长的固定时间有较强耐受性,但固定时间低至3h、不同的抗原修复法和抗体克隆号选择对检测结果有较大影响,二抗显色系统选择对检测结果无明显影响。

摘要：目的观察第10位丝氨酸磷酸化p27^kip1（P-p27Ser10）在乳腺癌组织中的表达情况，探讨其表达的临床病理意义。方法回顾性收集嘉兴市第一医院2004年1月至2005年12月行手术切除的111例乳腺癌组织标本，采用免疫组织化学EnVision二步法检测乳腺癌及相应癌旁正常组织中P-p27Ser10的表达情况并分析其与临床病理特征的相关性；提取6例新鲜乳腺癌手术标本的总蛋白并进行定量，蛋白质印迹检测乳腺癌组织与癌旁正常组织中P-p27Ser10和p27的表达；采用免疫共沉淀方法检测乳腺癌组织中P-p27Ser10与相关蛋白Jab1的结合情况。结果免疫组织化学及蛋白质印迹结果均显示，P-p27Ser10在乳腺癌组织中的表达显著高于在癌旁正常组织中的表达，本组乳腺癌组织中P-p27Ser10阳性表达率为88．3％（98／111），癌旁组织中为7．2％（8／111），两组之间差异有统计学意义（P〈0．05）；P—p27Serl0蛋白表达与肿瘤大小、腋淋巴结转移和TNM分期有关（均P〈0．05）；P—p27Ser1O与增殖指标硒-67表达呈显著正相关（r=0．582，P〈0．05），与p27表达呈负相关（r=-0．426，P〈0．05）；免疫共沉淀结果显示，在乳腺癌组织中，P—p27Ser10与Jabl蛋白结合明显增加。结论p27Ser10磷酸化参与了乳腺癌的发生发展，与乳腺癌患者的腋淋巴结转移和TNM分期有关。联合检测P—p27Ser10和p27可为乳腺癌的临床诊断及预后判断提供重要参考价值。

摘要：目的探讨肿瘤化疗药物对乳腺癌MDA-MB-231细胞中第10位丝氨酸(Ser10)磷酸化的细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27^(kip1)(P-p27Ser10)表达的影响。方法分别用化疗药物多西他赛(DOC)、表柔比星(EPI)及两者联合处理乳腺癌MDA-MB-231细胞,运用MTT比色法测定化疗药物对乳腺癌细胞活力的影响;采用Western Blot检测化疗药物处理前后P-p27Ser10、Jab1和p27^(kip1)蛋白表达水平。结果化疗药物DOC、EPI及两者联合处理对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖均有抑制作用,且随化疗药物浓度的增加抑制率增强,两药联合处理有更强的抑制作用。化疗药物处理后,P-p27Ser10和Jab1蛋白表达增加,p27^(kip1)蛋白表达降低,与单一用药相比,联合处理组蛋白表达改变更为明显。结论肿瘤化疗药物可能是部分通过p27^(kip1)Ser10的磷酸化变化引起p27^(kip1)及相关分子Jab1的改变,从而介导乳腺癌细胞的周期调控。p27^(kip1)Ser10磷酸化调节作用可能成为治疗乳腺癌的新途径。

摘要：Ki-67已成为预测乳腺癌患者治疗反应以及预后的重要生物学标志物。其检测一般采用免疫组织化学方法，但是目前尚无统一的操作指南对乳腺癌Ki-67免疫组织化学检测进行规范。我们采用组织芯片和计算机图像分析技术分析、评价各因素对Ki-67染色结果的影响，建立了乳腺癌Ki-67标准化免疫组织化学检测流程，并通过与乳腺癌分子分型等临床病理参数的相关性分析进一步验证其临床应用的有效性，为乳腺癌Ki-67规范化检测提供依据。

摘要：目的探讨第187位苏氨酸(Thr187)磷酸化的细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白(p27^(kip1),简称p27)(P-p27Thr187)在结直肠癌发生、发展中的作用及其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法收集行手术切除的80例结直肠癌组织标本,以及6对新鲜结直肠癌和相应癌旁正常组织标本;采用免疫组织化学EnVision二步法和蛋白质印迹法检测结直肠癌组织及相应癌旁正常组织中P-p27Thr187和p27的表达;并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果免疫组织化学和蛋白质印迹结果均显示,P-p27Thr187在结直肠癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织;结直肠癌组织中P-p27Thr187阳性表达率为100.0%(80/80),高表达者52例(65.0%,52/80),低表达者28例(35.0%,28/80);而癌旁正常组织中P-p27Thr187阳性表达率为13.8%(11/80),与结直肠癌组织比较差异有统计学意义(P<0.05);p27在结直肠癌组织中的阳性表达率为48.8%(39/80),癌旁正常组织中为90.0%(72/80),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);P-p27Thr187阳性表达与肿瘤细胞分化程度和TNM分期有关(均P<0.05);P-p27Thr187表达强度与细胞增殖指标Ki-67表达强度呈正相关(r=0.487,P<0.05),与p27表达强度呈负相关(r=-0.394,P<0.05)。结论结直肠癌组织中P-p27Thr187的异常表达可能参与了结直肠癌的发生、发展过程,其有助于综合评估结直肠癌的生物学行为,对结直肠癌的预后判断及诊治具有一定的参考价值。

摘要：目的探讨人乳腺癌MCF-7细胞中第187位苏氨酸(Thr187)磷酸化的细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27^(kip1)(P-p27Thr187)与化疗药物敏感性的关系。方法人乳腺癌MCF-7细胞常规培养,采用MTT法测定其对5种常用化疗药物[表柔比星(EPI)、多西他赛(DOC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、环磷酰胺(CTX)、顺铂(CDDP)]的敏感性;采用Western blot检测经化疗药物作用后P-p27Thr187、p27^(kip1)表达水平;采用免疫共沉淀方法检测P-p27Thr187与S期激酶相关蛋白2(Skp2)相互结合情况。结果5种常用化疗药物对人乳腺癌MCF-7细胞均有抑制作用,5-Fu的抑制率随浓度增加而增高,而其他4种化疗药物的抑制率开始随浓度增加而增高,但达到理论最高药物浓度(PPC)后降低(均P<0.01);在PPC下作用48h,抑制率从大到小的化疗药物依次为EPI、DOC、5-Fu、CTX、CDDP。Western blot结果显示化疗药物作用48h后,P-p27Thr187表达水平明显增加,以EPI、DOC增加最为明显(均P<0.01);p27^(kip1)表达水平明显降低(均P<0.01)。免疫共沉淀结果显示,经EPI 0.25μg/ml、DOC 6.80μg/ml作用48h后,P-p27Thr187与Skp2结合明显增加。结论 P-p27 Thr187与人乳腺癌MCF-7细胞化疗敏感性有关,可作为预测化疗敏感性及选择药物的一项新指标。

摘要：目的研究乳腺癌组织中第157位苏氨酸磷酸化p27^(kip1)(P-p27Thr157)的表达情况,探讨其表达与乳腺癌发生发展的关系。方法回顾性收集2004年1月—2005年12月于嘉兴市第一医院行手术切除的111例乳腺癌组织标本以及距肿瘤边缘5 cm以上的癌旁组织,并收集8对新鲜乳腺癌和相应癌旁正常组织标本用于蛋白提取。分别采用免疫组织化学EnVision二步法和蛋白质印迹法检测乳腺癌及相应癌旁正常组织中P-p27Thr157的表达情况;分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果免疫组织化学和蛋白质印迹结果均显示,P-p27Thr157在乳腺癌组织中的阳性表达显著高于其在癌旁正常组织中的表达,本组乳腺癌组织中P-p27Thr157阳性表达率为87.4%(97/111),高表达者64例(57.7%),低表达者47例(42.3%),而癌旁组织中阳性表达率为9.9%(11/111),2组之间差异有统计学意义(P<0.05);P-p27Thr157表达与肿瘤大小、淋巴结转移情况和TNM分期有关(均P<0.01);P-p27Thr157高表达患者的总生存率低于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05);P-p27Thr157与增殖指标Ki-67表达呈正相关(r=0.528,P<0.05),与p27表达呈负相关(r=-0.458,P<0.05)。结论乳腺癌组织中p27Thr157异常磷酸化可能参与了乳腺癌的发生、发展过程。检测Thr157磷酸化p27对乳腺癌的临床诊断及预后判断具有一定的参考价值。