摘要：为提高米曲霉(Aspergillus oryzae)糖苷水解酶家族(GHF)11木聚糖酶AoXyn11A的耐热性,将其N-端置换为来源于嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的同一家族耐热木聚糖酶pXYL11的对应区域。基于木聚糖酶耐热性的理性设计,采用大引物PCR技术将AoXyn11A基因(Aoxyn11A)的5′-端DNA片段置换为pXYL11人工合成基因(xyn11PM)的对应片段,构建出杂合木聚糖酶ATX11A基因(ATx11A)。分别将Aoxyn11A和ATx11A在毕赤酵母GS115中进行了表达,并分析了重组表达产物AoXyn11A和ATX11A的温度特性。结果表明:ATX11A的最适温度T_(opt)由AoXyn11A的50℃提升至65℃,在60℃的半衰期t_(1/2)^(60)为55 min,较AoXyn11A延长了41.3倍;ATX11A在55℃处理3 h保留60%以上的酶活性,而AoXyn11A处理15 min酶活性完全丧失。本研究通过N-端置换显著改善了AoXyn11A的温度特性。

摘要：构建人甲状旁腺激素(1-34)二联体与人血清白蛋白融合蛋白的表达载体,并表达得到该融合蛋白。通过设计强特异性的引物,利用重叠PCR技术,定向定量的拼接得到hPTH(1-34)二联体-HSA融合蛋白的基因;将构建好的融合基因插入表达载体pPIC9K,大量扩增重组质粒,并用SalI线性化,电击转化毕赤酵母GS115,经组氨酸缺陷和G418抗性双重筛选得到阳性转化子;挑选阳性转化子进行甲醇诱导表达。测序结果表明得到的重组质粒pPIC9K-hPTH(1-34)二联体-HSA与目标设计完全一致;基因组PCR鉴定结果证明成功构建了hPTH(1-34)二联体-HSA融合基因的毕赤酵母(GS115)表达系统;SDS-PAGE电泳表明融合蛋白获得了表达,尿微量白蛋白试剂盒测定甲醇诱导表达3d后融合蛋白的产量为127 mg/L。

摘要：研究了培养基组分及培养条件对宇佐美曲霉(Asp usamii) 固态发酵产木聚糖酶的影响。采用Plack ett Burman和Box Behnken实验设计确定了最佳培养基组成和培养条件为:麸皮3 4g ,玉米芯4 6 g ,NH4NO31% ,KH2 PO40 3% ,CaCl2 0 1% ,MgSO40 1% ,Tween 80 0 4 % (均为相对于固体料的质量百分数) ,液固比为1 2∶1;最佳初始pH为自然pH ,2 8℃静置培养72h ,其间翻曲2～3次。酶活最高达到74 4 2IU/g(干曲)。

摘要：人工合成的仿生鲶鱼抗菌肽DNA序列,经聚合酶链式反应(PCR)扩增后得到带有不同限制性酶切位点的序列XH1、XH2、XH3.将此基因克隆至载体pGEX-5X-3,成功构建了三串联的重组质粒.测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3),37℃IPTG诱导,获得高效表达,SDS-PAGE扫描分析表明,融合蛋白可达细菌全蛋白总量的30%,融合蛋白以包含体的形式存在于大肠杆菌细胞中.

摘要：本文介绍了25L全自动发酵罐及其配套装置的设计与制造。同时,列举了糖化酶和柠檬酸等菌种在该装置上发酵试验的例子,试验结果良好,是摇瓶发酵试验结果应用到工业大生产上不可缺少的中间试验环节。

摘要：利用基因工程技术改造酶分子已成为现代分子酶工程的一个研究热点,其中基于融合蛋白设计的融合酶技术已逐渐应用于多功能酶的构建中,表现出了重要的理论与应用研究价值。作为重组融合蛋白不可缺少的部分,连接肽已在融合蛋白的稳定性、生物活性等方面表现出重要的作用。根据近年来的最新研究成果,作者总结了自然界中天然连接肽的性质,并对糖苷水解酶融合酶中连接肽的分类及其对融合酶的作用作了归纳和总结,并对连接肽设计的关键问题进行了探讨和展望。

摘要：从实验室保藏的曲霉菌株中,通过筛选和紫外线诱变,获得了一株遗传性状稳定的酸性β甘露聚糖酶高产菌株Aspergillus usamii YL0178。在单因素试验基础上,采用Plackett Burman和Box Behnken实验设计确定的最佳产酶培养基组成和培养条件为:m(麸皮)∶m(豆饼粉)=7∶3,魔芋粉2%,KH2PO40.2%,MgSO40.1%,CaCl20.1%,NaNO31.5%(均相对于固体物料),液固比为1.2∶1,自然pH;31℃静置培养72h,期间翻曲2～3次。最高酶活可达3362IU/g(干曲)。

摘要：在对黑曲霉WM20-11产酸性β-甘露聚糖酶的培养基组分和培养条件单因素研究的基础上,设计了Plackett-Burman试验选取主要影响因素,并进行响应面分析.结果表明,黑曲霉WM20-11产酸性β-甘露聚糖酶的最适培养基和发酵条件为:水11.7 mL,麸皮9.0 g,豆饼粉1.0 g,魔芋粉0.98 g,玉米浆0.375 mL,(NH4)2SO4 12.5 g/kg,CaCl2 1.0 g/kg,MgSO4 1.0 g/kg,KH2PO4 2.5 g/kg(相对于固体料),自然pH;28 ℃固体静置培养96 h,期间翻曲2～3次.在此条件下,菌株产酶活性可达1 337 IU/g干曲.

摘要：超滤技术已开始广泛应用于化工、轻工、食品、生物、电子及废水处理等行业,是解决物质分离、浓缩、提纯等难题的不可缺少的一种操作手段,其重要性正在日益被人们所认识。 中空超滤系统主要由超滤膜、贮罐。

摘要：以含淀粉物质或糖类物质为主要原料,经黑曲霉菌种发酵得含柠檬酸的发酵醪以后,可分别提取制备柠檬酸和柠檬酸三钠产品。本文主要论述柠檬酸的黑曲霉菌种发酵和柠檬酸三钠的生产工艺技术,针对不同要求的柠檬酸三钠产品,设计了不同的工艺路线,有利于取得最佳的经济效益。