摘要：【目的】制备出一套针对港口航道致病性细菌检测的基因芯片,为港口航道基因芯片检测技术的研究及应用打下基础。【方法】采用常规方法提取目标菌株基因组DNA,以16S r DNA通用引物和gyr B基因保守区引物进行PCR扩增,使用Allele ID 6.0和Array Designer 4.25对扩增获得的目的片段进行寡核苷酸探针设计,经PCR筛选验证,目标探针以氨基化修饰后通过芯片点样仪点制在醛基玻片上;优化芯片杂交固定条件,并用于港口航道的水样检测,以验证微阵列基因芯片的检测效果。【结果】优化后的芯片杂交固定条件为探针点样浓度10μmol/L、紫外交联时间2.0 h、杂交温度65℃,有效提高了基因芯片检测的灵敏度,与传统检测方法相比可实现快速、高通量、准确的目标。研制的微阵列基因芯片可特异性检测出港口航道中含有的霍乱弧菌(Vibrio cholerae)、阴沟肠杆菌(Emterobacter cloacae)、溶藻弧菌(***)、哈氏弧菌(***)、副溶血弧菌(***)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和创伤弧菌(***)等7株致病性细菌,且均未出现非特异性杂交。【结论】针对港口航道致病性细菌建立的微阵列基因芯片检测技术具有特异性强、灵敏度高、快速便捷的特点,可用于港口航道及周边地区的海洋环境监测和海产品质量安全检测。

摘要：微信公众平台是“互联网+”教学改革的一种主动学习的教学工具。该研究基于“以学生为主体、教师为主导”的原则,从微信公众号辅助实验教学设计、教学模式实践探索、实践教学效果三方面对微信公众平台辅助实验教学模式进行了研究。微信公众号的构建提升了药学无机化学实验教学质量,为培养自主性学习的新时代优质大学生奠定基础,为高校“互联网+”教学课程设计和改革提供方法指导。

摘要：为了研究分析国内致病性嗜水气单胞菌的毒力因子的分布及与致病性的相关性及其防治,选取5种主要毒力因子气溶素(aerA)、溶血素(hlyA)、丝氨酸蛋白酶(ahpA)、抗金属蛋白酶(ast)、肠毒素(altA)设计5对特异性引物,用PCR方法进行检测,采用急性毒性实验方法测定菌株对异育银鲫的半数致死量(50%lethal dose,LD50),细菌药物敏感试验纸片扩散(K-B)法检测对抗生素的敏感性,结果显示:除菌株Hong12的LD50约为109 cfu,毒力弱外,其他毒力均较强,LD50均在106 cfu左右。aerA、ahpA、hlyA、altA、ast 5种毒力基因的携带率分别为77.8%、88.9%、100%、100%、77.8%。通过比较嗜水气单胞菌毒力基因的分布情况与其对鲫鱼致病性试验结果可以发现,aerA、ahpA为嗜水气单胞菌致病的主要毒力因子,与致病性存在相关性,ast与致病力存在一定相关性,但不是主要毒力因子,hlyA、altA与致病性不存在相关性。9株嗜水气单胞菌对青霉素、羧苄青霉素、万古霉素不敏感,对复合磺胺、头孢噻肟、利福平中毒敏感,对呋喃妥因、氯霉素、四环素、氧氟沙星高度敏感。

摘要：目的:优选芪玄抑甲宁方中有效成分的提取工艺。方法:以浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数为自变量,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷和迷迭香酸得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,采用星点设计-响应面法选取最佳工艺,并进行预测分析。结果:最佳提取工艺条件为浸泡时间74.4min,加水量为13.56倍,提取时间1.165h,提取次数2次,在此条件下,芪玄抑甲宁中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷、迷迭香酸含量总和的最大估计值为0.36,与预测值相符。结论:该方法简便合理,稳定,可预测性较好。

摘要：目的优化黄药子中黄独乙素的提取工艺。方法采用高效液相色谱法测定黄独乙素的含量。以黄独乙素的得率为评价指标,通过单因素试验初步确定最佳料液比、乙醇浓度、提取时间和超声提取次数。采用响应面试验设计进行提取工艺的优化。结果最佳提取工艺条件为:提取次数为3次,提取时间5 h,料液比(g/mL)为1∶65,优化得到的黄独乙素得率为0.377%。结论本方法工艺简单、快速、重现性好,可作为黄药子中黄独乙素的提取应用。

摘要：海水池塘养殖是我国沿海地区主要养殖模式,也是我国水产养殖支柱产业,主要以养殖虾、蟹等甲壳类为主。近些年发展极为迅速,养殖总产量及面积持续增长。目前我国海水养殖尾水处理几近空白,相关技术研究滞后,管理对策缺失,导致海水养殖海域乃至整个近海海域水体水质恶化,赤潮、病害等污染事件频繁发生,养殖用水资源匮乏,渔业产量和品质下降,造成了巨大的经济损失。因此,研究海水养殖尾水处理与排放控制技术、发展“环境友好”的新型养殖技术与模式已成为规模化海水养殖业亟待解决的关键问题。