摘要：本文构建了刚地弓形虫RH株致密颗粒蛋白7（GRA7）基因原核表达重组质粒，进行蛋白表达并分析重组蛋白的免疫反应性。设计合成引物，从弓形虫RH株基因组DNA中特异扩增出GRA7基因片段并进行序列分析。目的片段用EcoRI和BamHI双酶切后分别构建重组质粒pET32a-GRA7和pET28a-GRA7，而后转人大肠埃希菌BL21（DE3）中诱导表达，Westernblotting分析表达蛋白。结果显示，从弓形虫RH株中成功扩增出大小约710bp的GRA7基因片段，构建的重组质粒经双酶切和PCR鉴定及测序，目的基因片段与预期相符。重组质粒pET32a-GRA7经IPTG诱导后，可高效表达重组蛋白，Westernblotting分析显示重组GRA7蛋白能被弓形虫慢性感染血清识别，而重组质粒pET28a-GRA7未能诱导表达出目的蛋白。原核表达的重组GRA7抗原具有特异的免疫反应性，为弓形虫的诊断应用和疫苗研究奠定了基础。