摘要：目的　快速检测 6种疱疹类病毒DNA。方法　在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物 ,一对扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型、爱泼斯坦 巴尔病毒和人巨细胞病毒 4种病毒 ,另一对扩增水痘 带状疱疹病毒和人类疱疹病毒 6型 2种病毒。经DNA聚合酶链反应(PCR)扩增 ,并对扩增产物进行分子克隆序列分析后 ,选择BamHⅠ或BstUⅠ酶切对扩增产物进行鉴别。结果　 6种标准病毒株PCR扩增后产物为 5 10～ 5 92bp ,其最小检出量为 0 .1fg ,与乙型肝炎病毒、真菌、细菌和人类基因组DNA无交叉反应。用该方法检测临床 89份脑脊液 (CSF)和 75份血标本中的疱疹类病毒 ,13份 (14 .6 % )CSF和 2 6份 (34.7% )血标本为阳性 ,通过BamHⅠ或BstUⅠ两种酶切后能明确系何种疱疹类病毒。同时用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测该标本的HSVⅠ /Ⅱ、EBV和CMV这 4种病毒的IgM ,10例阳性。这 4种病毒的PCR阳性检出率为 30 .7% ,而ELISA法为13.3% (P <0 .0 5 ) ,具有显著的差异性。 38例正常健康儿童的血和 9份非病毒感染的CSF标本 6种疱疹类病毒DNA均为阴性。结论　PCR加限制性内切酶片段长度多态性分析具有特异敏感 ,快速准确的特点 ,为疱疹类病毒感染的早期快速诊断提供了有效的手段。

摘要：目的评价婴儿巨细胞病毒感染中聚合酶链反应(PCR)加限制酶分析的应用价值。方法在巨细胞病毒(CMV)DNA多聚酶基因中设计一对引物,对CMV进行PCR扩增、分子克隆、序列分析后,选择BstUI进行酶切以鉴别扩增产物。结果巨细胞病毒PCR扩增后产物为592bp,经BstUI酶切后证实为CMVDNA,其最小检出量为01fg,与乙肝病毒、真菌、细菌和人类基因组无交叉反应。用该方法检测临床32份血和5份脑脊液标本中的CMV,12份血和1份脑脊液标本阳性;同时用ELISA法检测血标本,5例阳性。PCR阳性检出率为375%,ELISA为156%(P<005)。9例诊断为CMV感染患儿经更昔洛韦治疗10～14天后,复查外周血巨细胞病毒DNA,有1例仍为阳性。结论PCR加限制酶分析能提高婴儿巨细胞病毒感染的诊断率。更昔洛韦可作为抗CMV感染的有效药物。