摘要：本文将寡核苷酸芯片和反转录(reversetranscription,RT)荧光标记两种方法相结合,初步建立了芯片检测马铃薯病毒RNA的新方法。针对常见的马铃薯病毒设计了寡核苷酸探针并制备了检测芯片,对从染病植物组织中提取出的RNA进行反转录,同时标记荧光,并进行了多重标记反应。该方法可同时检测4种病毒,虽然检测的灵敏度不够高,但是对于拷贝数较多的植物病毒,反转录标记只需一步反应,不失为一种操作更为简单快速,成本更低的靶序列制备方法,对于检测病毒种类未知的植物样本有一定应用价值。

摘要：报道了一种检测植物病毒核糖核酸(RNA)的新方法——RNA玻片杂交法。这种方法把互补脱氧核糖核酸(cDNA)芯片技术与RNA斑点杂交技术相结合,将植物样品的总RNA直接固定在玻片上,用荧光标记的病毒特异探针与芯片杂交后分析杂交信号以确定相应的样品有无该病毒侵染。参照膜杂交的方法,我们设计了一系列实验,对芯片的制备和检测条件进行了摸索,基本建立了在玻片上杂交检测RNA病毒和类病毒的方法。

摘要：目的建立仙台病毒(SeV)的核酸测序检测方法。方法根据SeV序列设计覆盖不同毒株的通用引物,然后优化成测序引物并摸索建库条件,进行核酸测序和结果分析。结果获得1对特异性强的通用引物,序列为:上游引物5'-GCTGCAAAACGCTGTGGG-3',下游引物5'-TGGRACYTCAGAAAGAATRGG-3';建库条件优化为:第一轮以cDNA为模板用通用引物扩增,第二轮以第一轮产物为模板用测序引物扩增。测序分析可以有效地将SeV与其他微生物区分开,并且精确到TianJin亚株。结论建立了SeV核酸测序检测方法,为后续SeV感染实验动物的检验检疫提供依据。