摘要：2008年对云南省主要花卉基地进行调查,获得症状表现为环斑、坏死,疑似番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒的蝴蝶兰样品。应用生物测定,结合现代电镜技术、免疫试纸条检测技术初步确定为番茄斑萎病毒属的凤仙花坏死斑病毒(Impaliens necrotic spot virus,INSV),通过设计的4对引物进行RT-PCR扩增和测序,获得核壳体蛋白(Nucleocapsid protein)基因核酸长度为886nts,RNAM编码的非结构蛋白(Nonstructure protein,NSm)基因核酸长度为681nts,依赖于RNA的RNA聚合酶(RdRp)基因核酸长度为1048nts,测序结果在NCBIBLAST网络数据库中比对,同时应用生物信息软件DNAman比对,其与INSV的同源性都达90%以上,都证明分离到的病原物为凤仙花坏死斑病毒(INSV)。

摘要：【目的】克隆并分析烟草NBS-LRR类抗病基因的同源序列(RGAs),为采用同源克隆技术挖掘烟草抗病基因提供理论参考。【方法】从基于NBS-LRR类抗病基因保守序列设计的简并引物中筛选扩增效果较好的引物用于扩增烟草RGAs,采用DNAMAN 6.0翻译成氨基酸序列,并与已知的其他植物抗病基因进行聚类分析。【结果】克隆获得6条与参比抗病基因具有高度同源性的烟草RGAs,大小在500 bp左右,但仅有4条RGAs具有连续的开放阅读框(ORF)及编码NBS功能结构域的核苷酸序列,命名为TRGA-87-1~TRGA-87-4。这4个烟草RGAs编码的氨基酸序列均含有NBS类抗病蛋白的多个典型保守基序,与已知的多种植物抗病基因编码的氨基酸序列均具有较高的相似性,其中,与烟草相关抗病基因编码的氨基酸序列相似性最高,为97.00%~100.00%,与其他植物的抗病基因编码氨基酸序列相似性为29.00%~53.00%,这些序列可分为3个亚类,其中TRGA-87-2与烟草N和亚麻L6聚为一类(TRGAⅠ),属于TIR-NBS-LRR类;TRGA-87-3和TRGA-87-4与水稻Xa-1和番茄Mi聚为一类(TRGAⅡ),属于non-TIR-NBS-LRR类,TRGA-87-1与拟南芥RPM1聚成一类(TRGAⅢ),属于non-TIR-NBS-LRR类。【结论】同源扩增技术可用于烟草中抗病基因的克隆、功能分析及定位等研究。

摘要：【目的】研究不同的肥料处理对烟叶机械承受能力的影响,及其潜在的作用机制。【方法】以云烟87为试验材料,设计大田试验,通过方差分析和显著性检验进行研究。【结果】与对照组相比,硫酸钾、硼砂、水溶性有机钾、水溶性有机钾+喷施含微量元素的菌肥和含微量元素的菌肥处理能显著提高云烟87脚叶、下二棚和腰叶的机械承受能力,降低田间折断率,同时能提高烟叶主叶脉中的木质素含量。研究结果显示,抗折损的烟叶主叶脉中木质素含量以及烟叶叶肉组织中的木质素合成关键酶过氧化物酶(POD)和L-苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性普遍偏高。烟叶的最大机械承受重量与主叶脉中的木质素含量呈正相关。主叶脉解剖结构特征表明,抗折断烟叶中的维管束厚度较大,机械组织较多,肥料处理能增加维管束厚度。【结论】以上肥料处理能提高烟叶叶肉组织中POD和PAL活性、叶柄主脉木质素含量,使茎秆机械强度增加,有效增强烟叶机械承受能力。