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抗肿瘤多肽基因重组、纯化方法改进及活性研究: 收藏
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引用; 《哈尔滨医科大学学报》2019年第6期53卷 561-564页; 作者：郑天虎刘兴汉赵玲王立新哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学研究室哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江哈尔滨150081; 目的改进抗肿瘤多肽30肽纯化方法并测定其活性。方法设计并合成His标签序30肽序列,与PTYB21重组后转化到大肠埃希菌Rosetta(DE3)pLysSS菌株,再经IPTG诱导、镍离子柱纯化后经SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达情况,DTT裂解后G25葡聚糖凝胶层...; 目的改进抗肿瘤多肽30肽纯化方法并测定其活性。方法设计并合成His标签序30肽序列,与PTYB21重组后转化到大肠埃希菌Rosetta(DE3)pLysSS菌株,再经IPTG诱导、镍离子柱纯化后经SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达情况,DTT裂解后G25葡聚糖凝胶层析分离30肽,测定浓度、纯度后,计算产量,MTT检测30肽抗肿瘤活性。结果重组的PTYB21-His-30肽大量地表达融合蛋白,经镍离子柱层析的纯化的30肽与传统提取方法几丁质层析方法总产量基本一致,并且具有较好的抗肿瘤活性。结论重组的抗肿瘤多肽表达载体经镍离子层析后能够纯化出理想的30肽,该纯化方法操作流程简单、节约成本,有利于抗肿瘤多肽的大规模提取。; 来源：详细信息评论

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