摘要：以牡丹品种"云芳"基因组DNA为模板,采用正交实验设计L25(55)对影响牡丹RAPD-PCR反应的5因素(模板DNA、引物、Mg2+、dNTPs、Taq酶)在5个水平上进行优化试验。结果表明:最佳的RAPD-PCR的反应体系为:20μL体系中含有25 ng的模板DNA,0.2μmol/L的引物,Mg2+1.0 mmol/L,1×buffer反应缓冲液,DNTPs各为0.2 mmol/L,1.0 U的TaqDNA聚合酶。

摘要：情感教育是教师在教学过程中有意识地以积极的情感去感染学生，激励学生，让学生从中得出肯定的反映，从而达到培养学生正确的学习动机、浓厚的学习兴趣、积极主动的学习态度和明确的学习目的。情感教育不仅影响学生掌握数学技能的速度和质量，而且也影响其智力发展。所以教师在教学中应充分激发和培养学生的积极情感。那么，如何在课堂教学中实施情感教育呢？

摘要：本试验旨在研究沙葱黄酮对肉羊生产性能和肠道组织免疫因子β-防御素-1(sBD-1)和β-防御素-2(sBD-2)基因表达的影响。选取60只健康、体重[(39.9±3.2)kg]相近的6月龄小尾寒羊羯羊,采用单因素完全随机区组设计,共分为4组,每组15只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加11(低浓度黄酮组)、22(中浓度黄酮组)和33 mg/kg沙葱黄酮(高浓度黄酮组)的试验饲粮,共饲喂70 d,其中预试期15 d,正试期60 d。每天记录各组羊的采食量,每隔15 d晨饲前空腹称重1次。试验结束后每组随机选取3只羊进行屠宰,采集十二指肠、空肠、回肠组织样,应用实时荧光定量PCR进行sBD-1和s B-2基因相对表达量的测定。结果表明:1)试验第30~45天以及第45~60天,各试验组肉羊的平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05),其中以高浓度黄酮组肉羊的平均日采食量最高;试验第45~60天,与对照组相比,各试验组肉羊的平均日增重显著提高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05),其中以中浓度黄酮组肉羊的平均日增重最高,高浓度黄酮组料重比最低。2)与对照组相比,饲粮添加33 mg/kg的沙葱黄酮显著提高了sBD-1基因在空肠和回肠中及sBD-2基因在空肠中的相对表达量(P<0.05),饲粮添加22 mg/kg的沙葱黄酮显著提高了sBD-2基因在十二指肠中的相对表达量(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加22~33 mg/kg的沙葱黄酮能够显著提高肉羊生产性能和β-防御素(sBD-1、sBD-2)基因在肠道组织中的表达。

摘要：目的探讨原核表达稀释复性的可溶性人FcγRⅡa（shuFcγRⅡa）的胞外区蛋白在体外与配体的结合活性。方法应用PCR技术从重组质粒pc3huRⅡ中扩增huFcγRⅡa的胞外区基因，将其克隆于原核表达载体pET-28a中。所构建的重组质粒经PCR和酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，制备融合蛋白包涵体。并采用多次洗涤法分离和纯化包涵体，用稀释法对纯化后的目的蛋白进行复性，ELISA和流式细胞术测定重组shuRⅡ在体外与配体的结合活性。结果扩增到了huFcγRⅡa的胞外区基因，所构建的pETshuRⅡ重组质粒经PCR和酶切鉴定与设计序列一致。转化B121（DE3）后，IPTG诱导目的蛋白表达率约为30％。SDS-PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量（Mr）约为24．8×10^3，与理论预期值一致。破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形式表达，经多次洗涤后蛋白纯度大于90％。ELISA法测得重组shuRⅡ与人IgG在体外有良好的结合活性，流式细胞术测得重组shuRⅡ对配体与受体结合有抑制作用。结论本复性方法可得到和天然蛋白类似生物学活性的目的蛋白。