摘要：目的通过与促溶蛋白融合表达,分离、纯化获得抗菌融合蛋白,并初步评价其抗菌活性。方法将绵羊骨髓细胞抗菌肽SMAP29的N端与源自噬菌体JD010裂解酶LysPA26的C端融合设计新的抗菌蛋白(AL)。通过同源重组构建pCold-His-TF-AL表达质粒。通过Ni-亲和层析和阴离子交换层析分离纯化AL,采用平板计数法初步评价AL的抗铜绿假单胞菌活性。结果在*** BL21(DE3)中,质粒pCold-His-TF-AL能明显表达出抗菌蛋白AL,并且90%以上的AL为可溶形式分布于***破菌液的上清液中。可分离纯化得到纯度超95%的AL。0.05 mg·mL^(-1) AL在30 min内可将铜绿假单胞菌PAO1菌量降低5.55个对数单位,具较高的抗菌活性。结论通过采用Trigger Factor标签融合表达和冷休克诱导方法可实现AL的高效可溶表达,纯化的AL对铜绿假单胞菌具有明显的抗菌活性。

摘要：LIMS是一种专为实验室设计的信息管理系统。矿山企业引入该系统有助于实现检测业务的数字化管理。然而,市面上通用的LIMS软件普遍存在与CNAS体系结合不紧密、流程管理不严谨、行业适用性不强等缺陷,无法满足矿山行业实验室的特殊需求。为此,结合CNAS质量管理体系要求以及矿山化验检测业务特点,研发了一款符合金属矿山行业特点的LIMS系统,对传统化验检测业务管理模式进行了全面改造和提升,内容涵盖业务管理、检测流程、结果汇总、报告管理、报告溯源和CNAS体系运行管理等多方面。该系统引入了样品类型、设备类型、化验岗位、再现性限设置以及报告权限设置等概念,并建立了关联关系,能够批量委托检测任务、灵活设置用户报告审批权限。根据关联关系,系统可自动将检测任务分配到特定的检测班组和化验岗位,自动计算检测项目的再现性限,判断平行检测结果是否超差,确定重验方式及平均结果的计算方法。此外,系统还利用LT-IoT数据采集平台,实现了分析仪器、天平、温湿度计、二维码等数据的自动采集,确保数据准确性、完整性和可追溯性,有效避免了传统手工录入导致的错误和不确定性。应用效果表明:该系统的研发与应用可以为金属矿山行业提供了一个高效、严谨、规范化的实验室信息管理系统,有助于提高检测业务的数字化管理水平,为行业的数字化转型提供强有力支持。

摘要：在公路工程设计中,路线是重要设计内容。为保证公路的行车安全与行车质量,设计人员需科学、合理地设计公路路线。设计人员在公路路线设计过程中,应严格遵守相关公路设计规范要求,了解、掌握公路工程现场实际情况,综合分析各种路线设计影响因素,对公路路线平面、纵断面、视距、生态环保等方面进行合理化设计。通过对公路路线设计中存在的问题及设计要点进行深入研究,为同类工程设计提供参考。

摘要：目的:改善重组人白介素-11在原核表达体系中的可溶表达水平以及在体内的循环半衰期。方法:通过构建白蛋白结合肽融合人白介素-11重组蛋白表达载体[pET-30a(+)-ABD-rhIL11],实现融合蛋白在原核表达体系中的可溶表达;基于疏水层析、离子交换层析和凝胶层析建立从破菌上清液中纯化ABD-rhIL-11的方法;通过圆二色光谱及荧光发射光谱分析等鉴定ABD-rhIL-11空间结构,并进行体内外活性及药效学评价。结果:成功获得纯度高于95%的重组融合蛋白,体外结合实验结果表明,ABD-rhIL-11能够迅速与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)结合;细胞增殖实验结果显示,ABD-rhIL-11与对照品活性相当;药代动力学结果显示,融合蛋白能够显著延长白介素-11在大鼠体内的循环半衰期;血小板计数实验结果显示,ABD-rhIL-11能够有效刺激大鼠血小板增殖。结论:为基于白蛋白结合肽融合策略的白介素-11药物长效设计提供了新的思路。

摘要：齐墩果酸是一个五环三萜类天然产物,具有多种生物活性和药理活性.以齐墩果酸为起始原料,采用间氯过氧苯甲酸以及过氧化脲等试剂进行其A环和C环内酯化修饰,以较高收率获得了系列齐墩果酸A/C环内酯化衍生物.所有产物均经~1H NMR、^(13)C NMR和高分辨质谱数据分析进行了结构确定,其中有12个化合物为新化合物.

摘要：目的针对G^(-)菌外膜阻挡裂解酶发挥作用的情况,设计抗菌肽-裂解酶双机制抗菌蛋白,并优化表达体系,获得可溶性表达的抗菌蛋白质。方法采用同源模建方法将绵羊骨髓细胞抗菌肽与源自噬菌体JD010的裂解酶融合设计新的抗菌蛋白质(SMAP-Lysin)。通过构建pET30a、pBV220表达载体的方式,利用小分子泛素样修饰蛋白(SUMO)的促溶作用,促进SMAP-Lysin的可溶性表达。结果仅在pBV220载体上,SMAP-Lysin有明显的表达,但其表达过程会诱导宿主细菌的死亡,无法有效分离纯化目标蛋白质;通过SUMO标签的促溶作用,可实现SMAP-Lysin的融合表达,且SUMO肽段的融合避免了宿主细菌的死亡;采用亲和层析,酶切步骤处理后,可得到纯化的抗菌蛋白质SMAP-Lysin。结论大肠杆菌是用于表达重组蛋白质的重要工程菌,采用SUMO标签融合表达的方式可有效降低抗菌蛋白对表达菌宿主的毒性,提高抗菌蛋白的可溶性表达,有利于抗菌蛋白的纯化。

摘要：校本课程建设是美术新课程改革的一项重要内容。美术校本课程应注重发掘地方文化资源，建立学科与教师间的横向交流机制，形成丰富的课程形态，运用灵活多样的教学方式，正确处理教学中欣赏与创作的关系，使校本课程成为初中美术教育重要的有机组成部分。

摘要：刚构连续Y型墩通常用于墩柱比较高的工程,以减少结构因整体温度升降和收缩徐变引发的内部应力。本研究基于背景工程,经过对桥梁基础的支承刚韧度合理考虑,解决了非软弱土场地刚构矮腿连续Y型墩受力问题。以常用的挂篮或支撑架小节段筑浇替代以支撑架现场长节段浇筑,整梁采取三期筑浇工艺,缩短了工期,俭省了工序。

摘要：为了提升整体桥梁结构设计效果,立足于实际,在分析中小跨径公路桥梁结构设计原则的同时,分别从中小跨径公路桥梁上部结构设计与下部结构设计以及基础设计三大方面,详细的探讨了该桥梁的设计方式。

摘要：在当前梁式桥梁工程项目的施工建设过程中,主要采用的是装配模式的混凝土施工方法,其中钢筋结构与混凝土的搭配使用是非常关键的。但是目前梁式的桥梁工程施工中还存在一些常见的质量通病和病害,因此了桥梁整体的安全性和稳固性,会引发各类安全风险和隐患。因此设计人员正在逐步完善和优化该类型桥梁的加固方案和策略,也希望通过科学合理的加固措施来应对出现的各类病害问题,从而提升桥梁工程的总体质量。