摘要：目的筛选鉴定针对Hl V-1vpr基因的小干扰RNA(siRNA)片段。方法根据siRNA设计要求合成siRNA56、siRNA160和siRNA185寡核苷酸片段,分别转染至含HIV-1vpr质粒的HEK 293T细胞,并进行总RNA提取,采用Real-time PCR和Western blotting分别从核酸和蛋白水平对HIV-1vpr基因表达水平进行验证。结果siRNAs成功转染含HIV-1vpr质粒的HEK 293T细胞,降低了HIV-1vpr基因的表达水平,其中在RNA水平siRNA160组干扰抑制作用最强,抑制率为89%;在蛋白水平siRNA56组干扰抑制作用最强,抑制率为96%。结论 3个基因片段的siRNA均可以下调HIV-1vpr的表达水平,但存在差异性,为探索HIV/AIDS基因治疗的可行性和高效性提供了可靠的实验依据。

摘要：目的 :对长沙市高校大学生进行性观念和艾滋病知识问卷调查 ,并评价开展性卫生和艾滋病相关知识教育的即时效果。方法 :参考KABP调查设计问卷 ,对长沙 2所高校 2 35名本科学生开展匿名问卷调查。请专家以讲座的形式就有关的知识进行教育 ,并进行讨论 ,教育前后以同样的问卷测试并作对比分析。结果 :388份有效答卷显示部分学生认可婚前性行为、多性伴、婚外情、同性爱、同性性行为和商业性性行为 ,且不因健康教育而有所纠正。多数人对艾滋病的一般知识和预防知识有一定了解 ,健康教育后大学生们的认识更为提高。关于正确对待艾滋病病毒感染者 ,教育前后在纠正认识和纠正态度方面存在差距。结论 :长沙大学生的性观念中存在着传播艾滋病和性病的高危因素 ,且在短期内不易被健康教育予以纠正。短期知识讲座和宣传对提高大学生的性卫生知识和艾滋病相关知识有较明显的作用 。

摘要：目的筛选鉴定针对HIV-1vpr基因的小干扰RNA（siRNA）干扰片段，探讨siRNA对HIV-1vpr基因的干扰效率。方法根据siRNA设计要求合成针对HIV-1vpr靶点的2段寡核苷酸片段，并构建相应载体，转染含HIV-1vpr质粒的HEK293T细胞。设2个实验组（siRNA56、siRNA160组），1个阴性对照组（NC组），空白HEK293T细胞为对照组（Con组）。各组分别进行总RNA、蛋白提取，实时PCR和蛋白质印迹分别从核酸和蛋白水平验证有效的靶向HIV-1vpr的siRNA片段。ELISA检测各组培养细胞上清液中IL-17、丫干扰素水平。结果DNA测序结果表明成功构建了哺乳动物细胞pRNAT—U6．1／Neo—Vpr-56／160（siRNA56和***160）表达载体。siRNA56和siRNAl60干扰使HIV1vpr基因在mRNA水平的表达分别下降69．0％和76．1％；在蛋白表达水平分别下降76．3％和86．5％。Con组、NC组、siRNA56组和siRNA160组细胞培养上清液中IL-17分别为（1．936±0．415）、（1．815±0．393）、（1．935±0．356）和（2．03±0．421）pg／mL；了干扰素分别为（1．673±0．234）、（1．648±0．332）、（2．169±0．362）和（2．301±0．4125）pg／mL。结论表达pRNAT—U6．1／Neo—vpr-56／160（sirNA56和siRNA160）的质粒构建成功，针对不同基因片段的siRNA均可以下调HIV-1vpr的表达水平。

摘要：为观察输血传播病毒ＴＴＶ在各类肝病病人中的感染状况，在日本ＴＴＶＯＲＦ_１保守区设计了两对套式引物，采用巢式聚合酶链反应两次扩增血清 ＴＴＶ ＤＮＡ，并对产物进行分子克隆和基因序列分析。结果显示：在非甲－成型和非庚型肝炎病人、血清ＨＢｓＡｇ阳性的肝炎病人、正常献血员、肝炎肝硬化病人、原发性肝癌病人中，血清ＴＴＶ　ＤＮＡ阳性率分别为４３．２％（１６／３７）、２８．８％（１５／５２）、９．３％（４／４３）、５１．９％（１４／２７）、３８．５％（５／１３）、３５．０％（１４／４０）和１７．３％（８／４５）。其中非甲－戊型和非庚型肝炎病人、血清ＨＢｓＡｇ阳性肝炎病人的ＡＬＴ平均为（４７２±２７６）ｕ·Ｌ^（－１）和（３８５±２１８）ｕ·Ｌ^（－１）；肝炎肝硬化病人ＴＴＶ　ＤＮＡ阳性率显著高于ＨＢｓＡｇ阳性肝炎病人。提示：ＴＴＶ感染和ＡＬＴ升高存在一定的关系；ＴＴＶ在慢性乙型肝炎向肝硬化发展过程中的作用，应进一步研究。

摘要：目的　观察新肝炎病毒 TTV在各类高危人群中的感染状况、基因分型及其在肝病发生和发展过程中的作用。方法　在日本株 TTV ORF1 保守区设计了两对套式引物 ,采用巢式聚合酶链反应扩增血清 TTV DNA,并对产物进行分子克隆和部分基因序列分析。结果　在非甲 -戊型和非庚型肝炎病人、血清HBs A g阳性的肝炎病人、正常献血员、肝炎肝硬化病人、原发性肝癌病人、静脉内吸毒者和女性与男性性乱者中 ,血清 TTV DNA 阳性率分别为 43.2 % (16 /37)、2 8.8% (15 /5 2 )、9.3% (4/4 3)、5 1.9% (14/2 7)、38.5 % (5 /13)、35 .0 % (14/4 0 )、17.3% (8/4 5 )和 18.8% (3/16 )。其中非甲 -戊型和非庚型肝炎病人、血清HBSAg阳性肝炎病人的 AL T平均为 (472± 2 76 ) u· L- 1 和 (385± 2 18) u· L- 1 ;肝炎肝硬化病人 TTV DNA阳性率显著高于 HBSAg阳性肝炎病人。同时 ,从非甲 -戊型和非庚型肝炎病人、血清 HBSAg阳性肝炎病人、正常献血员、静脉内吸毒者和女性性乱者中 ,分别获得 6份 TTV DNA ORF1 克隆 ,其基因序列与日本株TTV ORF1 部分基因核苷酸序列同源性为 97%～ 99% ,均属于 TTV 1a型。结论　 TTV感染和 AL T升高存在一定的关系 ;我国各类高危人群感染 TTV以 1a型为主 。

摘要：目的 :调查湖南高校学生的性观念和艾滋病相关知识 ,为制定相应对策寻找科学依据。方法 :参考KABP调查设计问卷 ,对湖南高校理、工、医、文各专业 1 999级和 2 0 0 0级大学本、专科学生进行匿名问卷调查。结果 :82 5名调查对象中部分人性观念相当开放 ,认可婚前性行为、多性伴、婚外情、同性爱、同性性行为和商业性性行为。多数人对艾滋病一般知识和预防知识有一定了解 ,但对某些问题仍存在误解。在如何对待艾滋病病毒感染者的态度方面存在明显分歧。结论 :湖南高校部分学生的性观念中存在传播艾滋病的高危因素 ;对艾滋病的相关知识虽有一定了解 ,但仍需进一步提高和普及 ;继续加强对湖南高校学生的性教育和艾滋病知识教育、特别是端正对艾滋病病毒感染者的态度方面 ,还有许多工作要做。

摘要：新肝炎病毒TTV主要通过血、体液和粪-口途径传播；近期又通过检测妊娠中期引产儿心脏血的TTV感染状态，确证存在TTV宫内传播，这在国内亦属首次。本研究采集23对妊娠3～6月的健康孕妇静脉血及其引产儿心脏血分离血清，常规酚-氯仿抽提DNA，用巢式PCR检测TTV DNA。参照中国株TTV基因序列，在其ORF1区设计两套引物，PCR扩增、凝胶电泳鉴定。孕妇和引产儿同时阳性者，进行基因测序并比较核苷酸同源性。结果显示，在23例孕妇中血清TTV DNA阳性5例（21.7%），其中2例引产儿阳性。测序结果表明，二对母婴之间同源性很高（97%，98%），证实均为TTV母婴传播。本研究显示，TTV可以通过胎盘传播，这比其他文献中检测新生儿血和脐血更可靠。因为在分娩的过程中，子宫强烈收缩可以破坏胎盘屏障，导致母血污染脐带血，这在以往HBV和HIV的研究中已经得到证实。而出生后检测不易完全排除消化道传播。本研究将为阻断TTV母婴传播提供重要参考。即不仅是产后选择非母乳喂养，还应该在怀孕前就开始预防。