摘要：结核病(TB)发病具有种族易感性的分布特点,揭示结核病种族易感性的发病机制对明确结核病的高危人群、制定相应的防控策略具有重要作用。本研究从宿主易感相关基因转录水平出发,探讨ASAP1、NRAMP1和SP110表达水平与蒙古族和汉族结核病发病的关联程度。基于病例-对照研究设计,收集蒙古族和汉族96例结核病患者和126例健康人群静脉血,采用实时荧光定量PCR的方法检测易感性关联基因ASAP1、NRAMP1和SP110的mRNA表达水平,并分析不同民族间、结核患者与健康对照组间基因表达水平的差异。蒙古族结核患者结核易感基因ASAP1、NRAMP1 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05),汉族结核病患者NRAMP1表达水平高于对照组(P<0.05)。蒙古族女性结核病患者,SP110的表达显著性差异(P<0.05)。汉族ASAP1、SP110 mRNA表达在结核病患者与对照之间没有显著差异。蒙汉民族结核病发病易感性与宿主基因ASAP1、NRAMP1和SP110表达有关,尤其是女性人群。提示结核病防治过程中可参考这些易感基因的表达评估结核病高危人群。

摘要：目的建立并评估基于微流控芯片(MC)技术检测布鲁氏菌(简称布氏菌)核酸的方法,以提高布鲁氏病(简称布病)的诊断能力。方法设计MC核酸提取、PCR和DNA反向斑点杂交相结合的检测布氏菌DNA的全自动技术流程。设计微流控全自动核酸检测(MC⁃PCR)与基因测序符合性测试、与实时荧光定量核酸扩增检测(qPCR)、TaqMan探针法检测比较实验;评估MC⁃PCR法检测布氏菌的重复性、准确性、特异性、最低检出限。结果研究组与对照组核酸溶解曲线图纵坐标峰值所对应的横坐标一致,呈现单一的溶解峰,温度相同,表示为相同的扩增产物。核酸不同提取方法之间Ct值差异有统计学意义(P0.05)。基因测序的Kappa值为0.659,与MC⁃PCR具有高度的一致性,MC⁃PCR与基因测序阳性结果符合率100%,总符合率82.5%。准确性:结果符合率为100%;特异性:结果阴性率100%;重复性:结果均可以检出布氏菌;检出限:浓度为825 copies/mL时,MC⁃PCR与qPCR、TaqMan探针法检出率差异有统计学意义(χ^(2)=24.699,P<0.05),经两两比较,MC⁃PCR检出率高于qPCR和TaqMan探针法。精密度:结果均可以检出布氏菌。结论MC⁃PCR检测布氏菌核酸的检测方法安全、快捷、及时、精准,可以应用于临床。这将提高布病诊断率,对布鲁氏菌病的防治起到重要作用。