摘要：据GenBank上公布的金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A(fibronection-binding protein A,FnbpA)基因序列,设计1对引物特异性扩增FnbpA基因A区(FnbpA-A),然后对其进行克隆、测序、蛋白二级结构分析及抗原表位预测。结果表明,FnbpA-A基因全长1645bp,编码548个氨基酸,与金黄色葡萄球菌CIG1835株同源性达100%;该蛋白含α螺旋13.69%、β折叠30.84%、β转角11.86%和无规则卷曲43.61%;B细胞表位可能位于N端31—46、54—69、142—157、303—318、324—339、450—465、491—506和533—548区段;T细胞表位可能位于N端353—361和245—253区段。综上所述,FnbpA-A可作为后续金黄色葡萄球菌基因工程亚单位疫苗候选基因筛选区域。

摘要：停乳链球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌,根据GenBank中登陆的停乳链球菌表面蛋白MIG基因序列,设计一对引物,采用PCR的方法从临床分离的停乳链球菌内蒙分离株基因组DNA中扩增出MIG基因,得到1条1 900bp的片段。将其连入PMD-19T载体中,经酶切,PCR及序列测定法进行鉴定。结果表明,MIG基因与Gen-Bank中停乳链球菌MIG基因(AF354651)序列的同源性为95%。构建原核表达载体PET-32a(+)-MIG,随后转化到大肠杆菌BL21(DH5a)中表达。表达产物进行SDS-PAGE分析后,表达的重组蛋白大小为89 ku。将纯化的MIG重组蛋白免疫兔,用ELISA检测其血清抗体。用制备出的抗血清与链球菌全菌进行玻片凝集试验,出现凝集颗粒。结果表明MIG重组蛋白具有较强的免疫原性,为停乳链球菌疫苗的研制奠定基础。

摘要：根据GenBank已发表的猪葡萄球菌的6种脱落毒素基因序列,设计合成了6对相应的特异性引物,通过特异性、敏感性和重复性试验建立了可行的多重PCR检测方法。用该方法对临床分离到的9株猪葡萄球菌进行检测,均扩增出了与预期大小相符的23SrDNA(662bp)条带;同时,其中6株分别扩增出了EXHA(316bp,2株)、EXHC(525bp,2株)和Shet-A(814bp,2株)基因特异性条带;另外3株均未扩增出任何毒素基因特异性条带,鉴定为无毒力菌株,以上结果与生化鉴定及单一PCR检测测序结果一致。结果表明,本试验所建立的多重PCR方法不仅操作快速方便、节约试验成本,而且具有高度特异性、敏感性和良好的重复性,可用于仔猪渗出性皮炎的诊断和猪葡萄球菌的快速鉴定。

摘要：通过对虚拟制造技术的详细介绍,阐述了虚拟制造技术在现代机械设计领域中具有广阔的应用前景,其核心技术——机械虚拟样机技术,从根本上改变了机械工程设计的传统模式,其广泛应用前景,必将成为目前最具影响力的技术之一。

摘要：从内蒙古地区山羊病料中分离出疑似山羊传染性胸膜肺炎的病原,经染色镜检、生化鉴定、血清学等方法初步鉴定为山羊支原体山羊肺炎亚种。参照已知山羊支原体ADI基因设计的引物进行PCR扩增,通过电泳分析得到与文献报道相一致的大小为316 bp的条带,最终确定为山羊支原体山羊肺炎亚种。

摘要：机械工程的技术创新在现阶段我国社会经济的发展当中具有举足轻重的地位。文章论述了机械工程的技术创新方法、创新设计、创新模式,并提出打造技术创新的实现机制,以便机械工程技术创新的顺利进行。

摘要：根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-ORF1。测序分析表明,克隆的ORF1与广东分离株DQ659154的核苷酸序列同源性高达99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%。将ORF1双酶切产物插入原核表达载体pET-41a,得到的重组子命名为pET-ORF1。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,PCV1ORF1在pET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为67.6 ku。

摘要：目的建立快速检测空肠弯曲菌的PCR方法。方法从鸡猪样品中分离培养获得空肠弯曲菌,以该菌特异的VS1基因保守序列为模板自行设计引物,扩增产物为516bp片段,同时进行特异性、灵敏度试验。结果显示该方法只对空肠弯曲菌有扩增产物出现,而其它细菌如大肠杆菌、沙门氏菌、无乳链球菌、粪链球菌、金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌ATCC、腐生葡萄球菌等均不能扩增出特异性片段,检测灵敏度达6 CFU/ml。结论该方法具有灵敏、高效、特异、稳定的特点。

摘要：本实验是将作者本人分离并鉴定的白色瘤胃球菌的总DNA作为模板,自行设计合成了一段引物,进行克隆,结果经大连宝生物工程有限公司进行序列测定,并对其测定结果进行分析。

摘要：停乳链球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌,根据GenBank中登陆的停乳链球菌表面蛋白MIG基因序列,设计一对引物,采用PCR的方法从临床分离的停乳链球菌内蒙分离株基因组DNA中扩增出MIG基因,得到一条1900bp的片段。将其连入PMD-19T载体中,经酶切,PCR及序列测定法进行鉴定。经DNA测序分析,证实与GenBank中停乳链球菌MIG基因(AF354651)序列同源性为95%,具有高度保守性。