摘要：以小菜蛾(Plutella xylostella)基因组DNA为模板,采用L16(45)正交试验设计方法,建立小菜蛾的ISSR最佳反应体系。通过梯度退火试验,确定不同引物的最适退火温度。优化得到的反应体系(20μL)为:Mg2+浓度1.5mmol/L、Taq DNA聚合酶2.5U、dNTPs浓度0.2mmol/L、引物浓度1.25μmol/L、模板DNA量20ng。反应程序为:94℃预变性5.0min;94℃变性45.0s,40～61℃(不同引物退火温度各异)退火1.0min,72℃延伸1.5min,40个循环;72℃延伸10.0min;10℃保存。利用所建立的ISSR-PCR反应体系,获得了清晰、重复性好的DNA谱带。

摘要：生物农药是一种环境无害、生物友好、病虫害防治特异性高的绿色农药。与化学农药相比,生物农药以较低毒害作用、良好的环境相容性、对人畜较为安全、开发成本低等特性被推广使用。然而,生物农药见效缓慢、产品质量稳定性差、施用有效期短、易受环境因素影响等缺点严重制约了其发展。农药纳米载体是指将农药有效成分通过静电相互作用、范德华力、π-π键的相互作用等以吸附、偶联、包覆、镶嵌等方式负载于纳米材料中的缓释剂型。基于新型纳米材料的控缓释技术能够有效克服上述生物农药的缺点,达到增强药效、提高农药利用率、靶向传输和精准缓释控释的防治效果。目前,化学农药控缓释研究较多,但针对生物农药的相关研究相对较少。本文简要介绍了生物农药的发展现状及存在的问题,重点阐述了纳米材料作为智能控释载体控缓释生物农药的应用进展,并展望了其在可持续农业中的发展前景,为今后生物农药的高效利用和推广提供了理论依据。