摘要：根据牛特异性线粒体DNA片段,设计合成1对引物,以生、熟牛肉为材料,建立了肉制品中牛源性成分的PCR检测方法,并用该法对市售的67份牛肉制品进行检测。结果显示,所检牛源性成分在271bp处出现预期的条带,扩增片段经Sau3AⅠ酶切分析确认,获得的214和57bp片段与预期一致;运用该引物均可扩增出水牛肉、牦牛肉、奶牛肉、黄牛肉单一的相同大小的DNA条带,而对羊、马、狗、驴、兔和鸭等14种动物肉的DNA扩增则呈阴性,其检测灵敏度达到53.2fg/μL DNA;利用该法对67份牛肉制品进行检测,检出率为100%。结果表明,该法快速简便,且具有较高的特异性和敏感性,可用于市售牛肉制品中牛源性成分的鉴定。

摘要：根据羊特异性线粒体DNA片段,设计合成一对引物,并以生、熟羊肉为材料,建立了肉制品中羊源性成分的PCR检测方法,并用于生、熟羊肉的鉴定。PCR扩增产物DNA片段大小为295 bp。用Sau3AⅠ限制性内切酶进行酶切鉴定,酶切产物为204 bp和91 bp。PCR产物和酶切产物的片段大小与预期目标相符,其检测灵敏度达到0.225 pg DNA。合成的羊源性DNA引物可以扩增出羊肉的目的 DNA片段,而对马、狗、驴、兔和猪等14种动物DNA无扩增效果。利用该法对83份羊肉制品进行鉴定,检出率为100%。结果表明,该法快速简便,且具有较高的特异性和敏感性,可用于市售牛肉制品中牛源性成分的鉴定。

摘要：根据GenBank中的猪源性的特异性基因序列设计一对特异性引物,对所提取的猪肉基因组DNA进行特异性的扩增,用于生熟猪肉及制品的鉴定。扩增出的PCR产物为特异的212 bp核苷酸片段,用限制性内切酶MnlⅠ进行酶切鉴定,酶切产物分别为196 bp和16 bp。PCR产物和酶切产物的片段大小与预期的目标相符合。特异性试验结果表明,从生熟猪肉中能扩增出特异性的核苷酸片段,但牛、羊、马、驴、兔和鸭等12种动物DNA的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,该方法的敏感性可达16.34 pg DNA。利用建立的PCR方法共对105份保定市售牛、羊和猪肉进行鉴定,结果显示,PCR方法检测肉制品中猪源性成分快速和简便,且具有较高的特异性和敏感性,可作为牛羊肉中猪源性成分快速检测的手段。