摘要：文章以M13通用引物和重复序列（CT）15、（AT）15引物，利用PCR法对中国龙虾（Panulirus stimpsoni Hoehuis）部分基因组DNA文库进行筛选。共获得78个微卫星序列，分别分布于55个阳性重组克隆中，其中完美型（perfect）共50个，占64％；非完美型（imperfect）3个，占3．8％；混合完美型（compound perfect）6个，占7．7％；混合非完美型（compound imperfect）19个，占24．5％。根据微卫星序列，设计并筛选出15对微卫星多态性引物，对中国龙虾的群体进行了遗传多样性分析。获得3～12个等位基因，等位基因大小在78～425bp之间，基本符合引物设计的理论长度。期望杂合度范围为0．48～0．87，平均值为0．71，表明中国龙虾基因组微卫星具有较高的杂合度与遗传多样性。15个微卫星位点的P1C值从0．44到0．84，平均值为0．60，说明这些微卫星位点在中国龙虾基因组中包含丰富的遗传信息，合适用于中国龙虾的各种分子标记及遗传学分析和应用。

摘要：采用PCR法快速筛选勒氏笛鲷(Lutjanus russelli)基因组文库,以获得(CA)n微卫星位点。勒氏笛鲷基因组DNA经限制性内切酶HaeⅢ+DraⅠ双酶切后,连接T-载体克隆,构建基因组文库。以通用引物M13+/-与重复序列引物(CA)15对基因组文库进行筛选,二次筛选后得到121个可能含有微卫星位点的阳性克隆。进行序列测定,共获得53个CA(n≥7)重复序列,重复次数主要分布于7～15(80.77%)。在所得微卫星序列中,重复单元除CA外,还观察到单碱基、三碱基、四碱基、五碱基重复单元。根据侧翼序列设计48对引物,通过优化PCR反应条件,可获得清晰可重复的目的条带。研究旨在为勒氏笛鲷遗传多样性研究及遗传图谱的构建等奠定基础,为勒氏笛鲷资源的合理开发利用提供参考。

摘要：以中国南海海域青石斑鱼(Epinephelus awoara)为材料,构建青石斑鱼小片段部分基因组DNA文库。以M13通用引物和设计合成的微卫星核心序列引物(CA)15,用PCR法对文库进行筛选,共获得96个微卫星序列,分别分布于28个阳性重组克隆中,其中perfect(完美型)共39个(占40.6%),imperfect(非完美型)30个(占31.3%),compound perfect(混合完美型)7个(占7.3%),compound imperfect(混合非完美型)20个(占20.8%)。同时发现(CA/GT)n序列在青石斑鱼的基因组DNA中含量非常丰富。根据微卫星侧翼序列设计28对引物扩增青石斑鱼基因组DNA,有26对引物能扩增出目的片段,选用其中13对多态性稳定的引物对19尾青石斑鱼进行遗传多样性分析。结果显示,13个位点共检测到48个等位基因,平均观测杂合度(Ho)为0.5982,平均期望杂合度(He)为0.5080,平均多态信息含量(PIC)为0.4722,平均Hardy-Weinberg遗传偏离指数(D)为0.1503。实验初步表明中国南海海域青石斑鱼的遗传多样性较为丰富,但在某种程度上受到了人为的干扰。

摘要：利用磁珠富集法,以生物素标记的(CA)15为探针,构建了蛇鳄龟(Chelydra serpentina L.)微卫星富集文库。通过PCR法从富集文库中共筛选出70条微卫星序列,一共设计了48对微卫星引物,采用PCR扩增的方法从中筛选出36对引物,对一个蛇鳄龟养殖群体进行遗传多样性分析。通过分析,36个位点获得的等位基因数从2—9不等,平均为4.361,有效等位基因为1.461—7.767,平均为3.498。等位基因片段大小为56—342 bp,观测杂合度为0.067—1.000,平均为0.725;期望杂合度为0.316—0.850,平均0.600;多态信息含量为0.2655—0.8359,平均为0.5573;结果表明此蛇鳄龟养殖群体存在较高的遗传多样性水平。群体内固定系数0.688—0.856,平均为0.214,说明蛇鳄龟群体中杂合子过剩。

摘要：为研究雷州半岛湖栖鳍虾虎鱼(Gobiopterus lacustris)遗传多样性,对湖栖鳍虾虎鱼雌雄性腺进行转录组测序,采用MISA软件进行微卫星分析,共获得25 452个微卫星标记,其中包含14 708个单碱基重复类型,6 175个2碱基重复类型,3、4、5和6碱基重复类型数目分别为4 223、327、15和4。随机选取50个微卫星位点设计引物,能够扩增出清晰稳定条带的有39对,其中,11个位点表现出不同程度的多态,28个位点呈现单态。利用11个具有多态性的微卫星位点分析湖栖鳍虾虎鱼在廉江市高桥镇红树林保护区、湛江东海岛、雷州市附城镇和雷州市九龙山红树林国家湿地公园4个野生群体中的遗传多样性及遗传结构,11个微卫星位点呈现出不同程度的多态性,等位基因数(Na)2~15,平均等位基因为(6?3.9)个,有效等位基因数(Ne)、平均观测杂合度(Ho)和期望杂合度(He)分别在1.919~2.485、0.343~0.465和0.381~0.483之间,平均多态信息含量(PIC)为0.348~0.465。Hardy-Weinber平衡分析显示,4个群体的大部分位点未偏离平衡。在每个群体中进行连锁不平衡分析,有18对位点间显著(P <0.05)或者极显著(P <0.01)偏离连锁平衡。遗传分化系数在0.107~0.216之间,表明4个群体的遗传分化达到了中等水平以上。分子方差分析(AMOVA)显示,湖栖鳍虾虎鱼大部分的差异来自于群体内而非群体间。

摘要：为了对引进种泰国虎纹蛙加强种质监测,本文对泰国虎纹蛙和中国虎纹蛙进行了SCAR标记研究。在对2种蛙随机扩增多态DNA(RAPD)标记研究的基础上,选用随机引物OPP5和OPZ19对2种蛙进行扩增,将2个特异性扩增片段OPP5-471bp和OPZ19-512bp回收、克隆和测序,并根据序列信息设计两对SCAR引物SP5和SZ19。利用两对SCAR引物对2种蛙基因组DNA扩增的结果显示:SP5显示了其特异性,在对中国虎纹蛙的扩增中出现了单一SP5-388bp特异片段,而在泰国虎纹蛙中没有扩增产物;SZ19在对2种虎纹蛙的扩增中出均出现了单一条带,但片段大小不同,在中国虎纹蛙中为SZ19-456bp,在泰国虎纹蛙中为SZ19-497bp。3个分子标记都可作为基于RAPD成功转化后的SCAR分子标记对2种虎纹蛙进行鉴定。

摘要：以湖栖鳍虾虎鱼为实验材料,从受精、正常胚胎发育过程的观察,环境因素对胚胎发育的影响,内分泌干扰物的浓度梯度刺激对胚胎发育的形态学观察及相关基因表达水平的检测等一系列连续实验的设计,可为生物科学专业发育生物学的综合性实验设计提供参考,使学生掌握一系列发育生物学的基本实验技术,增强学生对知识的理解层次,培养学生的科研兴趣。

摘要：为揭示波纹巴非蛤种质遗传特性、开发种质库,利用FIASCO(Fast Isolation by AFLP of Sequences Containing Repeats)技术开展了其基因组微卫星标记的分离与筛选研究。基因组DNA经限制性内切酶MseI酶切后与接头连接,用生物素标记的(CA)15或(AAG)7探针与其杂交,然后用磁珠富集、洗脱获得单链目的片段,经PCR扩增后形成双链,最后进行克隆转化,构建微卫星富集文库。挑选克隆用探针引物(CA)15或(AAG)7和载体引物进行PCR筛选,测序得到含有微卫星DNA的序列,根据序列设计和合成微卫星引物,进行引物适用性分析,并分析了湛江群体的遗传结构。结果表明:8对微卫星引物在湛江群体共检测到108个等位基因,每个位点等位基因数为5～19,期望杂合度为0.666～0.926,观测杂合度为0.400～0.882,4个位点(Pun4,Pun5,Pun6,Pun7)显著偏离哈迪-温伯格平衡(P0.5)。说明FIASCO技术适合于波纹巴非蛤微卫星标记的分离与筛选,筛选得到的8个微卫星位点能用于波纹巴非蛤遗传多样性分析及野生群体与养殖群体的群体结构分析。

摘要：根据虾虎鱼类的特殊生物习性,利用防腐蚀的亚克力塑料材质制作一种漏斗式圆台虾虎鱼捕获装置。该装置可与传统的捕捉方式比较具有明显的高效性、普适性,对滩涂原生态环境的破坏力度较低,而由于亚克力材质成本相对较高,从而导致无法广泛应用于我国东南沿海的渔业生产中来,仅适应于无经验的科研工作者科研样本采集,很好地限制了虾虎鱼类的捕捉数量,保护了野生虾虎鱼类种质资源不被过渡捕捉,维护了海陆交界处的滩涂、河口和红树林等生态系统平衡。

摘要：【目的】开发弓背青鳉(Oryzias curvinotus)三亚群体(下称“三亚青鳉”)遗传性别鉴定分子标记,为进一步挖掘其性别决定基因奠定基础。【方法】用染色体商(Chromosome quotient,CQ)法比较雌雄两性个体的全基因组重测序覆盖度,筛选潜在的性别特异性序列区域(CQ<0.1)并设计引物,通过PCR扩增验证引物区分三亚青鳉群体及其子代性别的适用性。【结果】经CQ分析筛选,CQ<0.1的特异性区域279个,设计引物279对。随机挑选的60对引物中,29对标记引物在三亚青鳉群体雄鱼中扩增得一个DNA条带,雌鱼无条带,均可鉴定三亚青鳉遗传性别。从29对引物中随机挑选2对引物(命名为Marker1和Marker2)进一步验证,引物Marker1、Marker2在雄鱼中扩增产物分别为791、556 bp,两对引物对三亚青鳉子代群体的扩增结果与亲本一致。用两对性别特异性标记对三亚群体的F2代全同胞家系94个个体进行扩增,结果发现F2群体自然性别比约1∶1。【结论】性别特异性引物Marker1和Marker2均可对三亚青鳉群体进行遗传性别鉴定,在三亚青鳉野生亲本及其子代中均有稳定性和通用性,可用于弓背青鳉三亚群体遗传性别鉴定。