摘要：目的 检测鲍氏不动杆菌的耐药表型及abaR基因并探讨该基因对鲍氏不动杆菌生物膜形成的影响。方法 2014年2—7月，从上海交通大学医学院附属瑞金医院临床微生物科收集到159株鲍氏不动杆菌，按收集顺序从1开始进行编号。（1）通过检测鲍氏不动杆菌16S核糖体DNA序列对上述159株鲍氏不动杆菌进行菌种鉴定，根据药物敏感试验结果挑选出泛耐药菌株和敏感菌株，记录其菌株数及其标本来源。（2）取鲍氏不动杆菌泛耐药菌株和敏感菌株，培养12、24、48、72 h，通过噻唑蓝法测定鲍氏不动杆菌生物膜形成情况（以吸光度值表示）。（3）通过美国国家生物技术信息中心基因数据库进行基因序列分析鲍氏不动杆菌ATCC 17978中abaR基因序列，并将其与嗜油不动杆菌DR1菌株的LuxR型受体AqsR基因序列进行比对。以鲍氏不动杆菌ATCC 17978 abaR为目的基因序列，PCR扩增87和96号鲍氏不动杆菌菌株并测序。将测序结果与鲍氏不动杆菌ATCC 17978 abaR基因序列进行比对。（4）取87号和96号鲍氏不动杆菌菌株，每株细菌均分为0.1%二甲基亚砜（DMSO）组、10 μmol/L N－庚酰－L－高丝氨酸内酯（C7－HSL）组、10 μmol/L N－（3－氢氧化十二酰基）－DL－高丝氨酸内酯（OH－dDHL）组、1%DMSO组、100 μmol/L C7－HSL组、100 μmol/L OH－dDHL组，每组3孔，分别用对应终体积分数的DMSO或对应终物质的量浓度的C7－HSL和OH－dDHL处理。通过噻唑蓝法检测培养12、X4、48 h，87号菌株和96号菌株的生物膜形式情况（以吸光度值表示）。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。结果 （1）共收集18株泛耐药菌株和5株敏感菌株，其中泛耐药菌株主要分布于本院急诊ICU、烧伤整形科，标本以痰液、血液及创面分泌物为主；敏感菌株来源分散，标本以痰液为主。（2）鲍氏不动杆菌泛耐药菌株培养各时相点吸光度值与敏感菌株相近（P值均大于0.05）。鲍氏不动杆菌泛耐药菌株培养24 h吸光度值均显著高于该类菌培养12、48、72 h（P值均小于0.01）；鲍氏不动杆菌敏感菌株培养24 h吸光度值显著高于该类菌培养12 h（P〈0.01）。（3）鲍氏不动杆菌中存在LuxR型受体abaR基因序列，与嗜油不动杆菌DR1菌株中的LuxR型受体AqsR相似度为87%。87号菌株及96号菌株中的abaR基因序列与鲍氏不动杆菌ATCC 17978的相似度分别为98%、99%。（4）87号菌株0.1%DMSO组培养各时相点吸光度值和1%DMSO组相近（P值均大于0.05）。96号菌株0.1%DMSO组培养12 h吸光度值显著低于1%DMSO组（P〈0.01），培养24 h吸光度值显著高于1%DMSO组（P〈0.01）。87号菌株及96号菌株10 μmol/L C7－HSL组培养24 h吸光度值均显著低于各自对应的0.1%DMSO组（P值均小于0.01）。87号菌株100 μmol/L C7－HSL组培养各时相点吸光度值与1%DMSO组相近（P值均大于0.05），96号菌株100 μmol/L C7－HSL组培养12 h吸光度值显著低于1%DMSO组（P〈0.01）。87号菌株和96号菌株10 μmol/L OH－dDHL组培养各时相点吸光度值与0.1%DMSO组相近（P值均大于0.05）。87号菌株100 μmol/L OH－dDHL组培养各时相点吸光度值与1%DMSO组相近（P值均大于0.05）。96号菌株100 μmol/L OH－dDHL组培养12 h吸光度值显著高于1%DMSO组（P〈0.01）。87号菌株及96号菌株0.1%DMSO组和1%DMSO组培养24 h吸光度值均显著高于培养12、48 h（P值均小于0.01）。结论 鲍氏不动杆菌泛耐药菌株普遍存在。鲍氏不动杆菌中存在abaR基因，与生物膜形成相关。

摘要：思想政治课教师课堂主导力的高低,直接影响着教学效果。在现实中,存在思政课教师讲课内容不够吸引人、理论知识讲解不够透彻、学生不能够完全理解所讲内容、提出疑问没有得到很好解答等问题,需进一步彰显思想政治理论课教师的课堂主导力。彰显思想政治理论课课堂主导力,需明晰立场、把握目标、注重方法和设计情境。要在立场上主导,坚持以马克思主义为指导;要在目标上主导,坚持立德树人根本任务;要在方法上主导,以完善教学手段为抓手;要在情境上主导,以打造和谐课堂为重点。

摘要：目的探讨敲除abaR基因对鲍氏不动杆菌生长代谢和生物膜形成的影响。方法应用同源重组方法敲除鲍氏不动杆菌ATCC 17978(野生株)abaR基因,获得ATCC 17978abaR敲除株(ATCC 17978/ΔabaR::Kn),通过PCR电泳和测序验证。应用酶标仪测定鲍氏不动杆菌野生株和敲除株培养18 h内的生长曲线,同时应用结晶紫染色法分别于培养8、24、48 h,测定生物膜形成能力,结果均以吸光度值表示,每个时间点样本数为3。对数据进行析因设计方差分析、单因素方差分析、t检验、LSD检验。结果(1)打靶片段ΔabaR::Kn的PCR产物大小为3029 bp。ATCC 17978野生株成功敲除abaR基因后获得ATCC 17978敲除株(ATCC 17978/ΔabaR::Kn),敲除株PCR产物大小3300 bp,说明abaR基因被成功敲除。(2)培养2、3、4 h,鲍氏不动杆菌野生株吸光度值稍高于敲除株;培养5~18 h,鲍氏不动杆菌野生株和敲除株各时间点吸光度值相近。(3)培养8、24 h,鲍氏不动杆菌野生株生物膜形成能力(0.644±0.066、0.574±0.184)与敲除株(0.559±0.008、0.394±0.030)相近(t=2.209、1.167,P>0.05);培养48 h,鲍氏不动杆菌野生株生物膜形成能力(1.157±0.259)明显强于鲍氏不动杆菌敲除株(0.576±0.026,t=3.865,P<0.05)。鲍氏不动杆菌野生株培养48 h的生物膜形成能力明显强于培养8、24 h(P<0.05),鲍氏不动杆菌敲除株培养24 h的生物膜形成能力明显弱于培养8、48 h(P<0.05)。结论利用同源重组方案,可成功敲除鲍氏不动杆菌ATCC 17978 abaR基因,获得鲍氏不动杆菌敲除株ATCC 17978/ΔabaR::Kn。敲除abaR基因后,鲍氏不动杆菌自身的生长代谢不受影响,但其生物膜形成能力明显减弱。