摘要：变形链球菌是目前公认的、最重要的一种致龋菌，早期鉴定人群口腔中的变形链球菌对于龋病活性检测和早期预防有着重要意义。变形链球菌的常规检测方法很多，但均操作复杂，检测周期长，且特异性和敏感性不高。近年来，分子生物学技术在细菌的鉴定和分类学中逐步被采用。核酸探针是分子生物学的基本工具，具有示踪性和显示性的特点。本文利用自行设计并经灵敏度和特异度检测的、针对变形链球菌国际标准株主要毒力因子gtn3的寡核苷酸探针，对80名不同龋敏感者口腔中的变形链球菌进行检测，定性分析gtm基因片段检出率与龋病的关系，为以后寡核苷酸探针作为一种筛检方法用于临床奠定基础。

摘要：针对离散型制造企业生产能力不平衡问题,运用约束理论(Theouy of Constvains,TOC)的瓶颈识别及DBR控制方法,进行了生产能力平衡与优化研究。在理论上考虑生产准备时间和宽放系数,建立了离散型制造企业生产能力平衡优化模型,设计了模型求解的启发式算法,并通过实例验证了模型和算法的有效性,为离散型制造企业生产能力均衡分配和调整提供了行之有效的科学方法。

摘要：目的调查西安市幼儿园教师口腔健康知识、态度与行为状况,探索幼儿教师口腔健康知识、态度与行为的影响因素。方法采用分层整群随机抽样的方法,抽取西安市9所幼儿园的幼儿教师作为研究对象,使用自行设计的封闭式问卷调查西安市幼儿教师对口腔基本常识的了解、对乳牙龋齿的态度以及个人口腔卫生行为。结果共收集有效问卷320份,统计分析显示不同类别幼儿园教师工作年限和文化程度间有较大差异(P<0.001);幼儿教师对所调查口腔基本常识的知晓率均高于60%;省级幼儿园教师对各项口腔基本常识的知晓率均大于非省级幼儿园教师,差异有统计学意义(P<0.05);工作年限≥5年的幼儿教师对各项口腔基本常识的知晓率均大于工作年限<5年的幼儿教师,差异有统计学意义(P<0.05);91.25%的幼儿教师选择知晓如何进行有效刷牙,但是在口腔卫生行为的调查中发现每天刷牙2~3次的仅占83.75%,每次刷牙3 min以上的不足40%。结论高等级幼教机构的、高学历的、高年资的幼儿教师对于口腔基本常识和儿童口腔保健工作有着相对更好的认知水平,但是在口腔卫生行为方面与其他幼教老师相比并无差异,显示了知信行的明显不统一。

摘要：目的:设计变形链球菌ATCC25175毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针,并进行敏感性和特异性检测。方法:采用斑点杂交法,将体外合成的变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针与经PCR扩增的S.M及7种口腔常见细菌DNA进行杂交检测,然后,使用该探针测试来源于髙龋和无龋个体的唾液样本。结果:探针检测同源性序列敏感性达到1ng水平;与7株口腔常见菌种的杂交结果不存在菌株间的交叉反应,具有较高的特异性。结论:变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针敏感性高而且特异性好,化学性质稳定。同时,观察临床唾液样本测试结果发现,其阳性率与个体龋患现状基本一致。可以进一步考察该探针检测结果与临床病例龋患风险的一致性,为今后用于大规模流行病学调查中龋高危人群的筛查奠定基础。

摘要：目的:构建趋化因子受体(CXCR4)特异的RNA干扰质粒载体。方法:根据GenBank数据库提供的CXCR4基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-CXCR4)稳定转染至人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系,并应用RT-PCR和流式细胞术对细胞CXCR4的表达进行检测。结果:与Mc3细胞和转染空白质粒pWH1 Mc3细胞相比,转染pWH1-CXCR4表达载体的Mc3细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论:构建的CXCR4特异性shRNA表达载体可有效的沉默CXCR4基因,为进一步研究CX-CR4表达对涎腺黏液表皮样癌增殖和转移的意义及治疗涎腺黏液表皮样癌奠定了基础。

摘要：目的:建立实时定量检测口腔内变形链球菌的实时定量聚合酶螺旋反应(PSR)方法。方法:针对变形链球菌的gtf B基因设计4套引物,通过实时浊度法和显色法两种方法判断结果。结果:从4套引物中筛选出最佳引物,并确定最佳温度为65℃;进一步实验表明采用最佳引物能特异性地检测变形链球菌,与13种其他病原核酸无交叉反应,敏感性达10拷贝/μL。结论:建立了实时定量检测变形链球菌的PSR方法,该方法具有简单快速、特异性强、敏感性高的特点,为实时定量检测变形链球菌提供了新技术。

摘要：目的体外培养人乳牙牙周膜干细胞,建立符合实验设计需要的人乳牙根尖周炎细胞模型。方法采用酶解组织块法培养人乳牙牙周膜干细胞,连续梯度稀释法进行纯化,流式法鉴定细胞表面标记物,检测其多向诱导分化能力。在培养基中加入不同终浓度(0.1,0.075,0.05,0.025,0.01μg/ml)的大肠杆菌脂多糖,通过检测细胞活性及炎症因子表达,选择合适的大肠杆菌脂多糖浓度。结果酶解组织块法可获得成集落状生长的人乳牙牙周膜干细胞,流式鉴定高表达CD146、STRO-1、CD105、CD90、CD29,低表达CD45、CD34,细胞成骨、成脂诱导后分别对茜素红、油红O染色阳性。0.05μg/ml的大肠杆菌脂多糖不影响细胞增殖活性(P>0.05),能显著提高炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论0.05μg/ml的大肠杆菌脂多糖可作为诱导人乳牙牙周膜干细胞炎症模型的适宜浓度。

摘要：目的构建基质金属蛋白酶-1(MMP-1)特异的RNA干扰质粒载体。方法根据GenBank数据库提供的MMP-1基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA(Short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-MMP1)稳定转染至人腺样囊性癌ACC-M细胞系后,应用RT-PCR、免疫组织化学及Western Blot对细胞MMP1的表达进行检测。结果在成功转染pWH1-ACC-M表达载体的ACC-M细胞中,MMP1 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论成功构建了MMP1特异性shRNA表达载体,可有效地沉默MMP1基因,为进一步研究MMP1表达与腺样囊性癌增殖和转移的相关性奠定了一定的实验基础。