摘要：[目的]分析家蚕Bombyx mori受饥饿胁迫后的蛋白质谱变化,探索其耐受饥饿的机理。[方法]以家蚕品种932为实验材料,利用双向电泳和质谱技术检测5龄起蚕经过24 h饥饿胁迫的蛋白质谱差异变化,利用荧光定量PCR技术分析Bm Lp-c6的转录表达。[结果]经比对饥饿蚕和正常取食蚕的血淋巴蛋白谱,饥饿蚕有62个特异蛋白点。蛋白点的等电点在4.22～6.98之间,分子量分布在20.81～144.69 k Da间。选取只在饥饿时出现的特异蛋白点No.7111进行质谱鉴定,根据其氨基酸序列进行引物设计,获得了目的基因Bm Lp-c6,经与载体p ET-21d（＋）连接重组后,成功获得诱导表达。经实时荧光定量PCR分析,当5龄起蚕受到饥饿胁迫影响时,Bm Lp-c6基因在血淋巴中大量转录表达,但在中肠中的转录表达水平却极低。[结论]家蚕5龄起蚕在饥饿胁迫下,血淋巴中的蛋白质谱发生变化,Bm Lp-c6会大量转录表达。

摘要：以转抗菌肽BD基因辣椒为材料 ,研究建立转基因食品中外源目的蛋白的检测技术 ,并建立对其忠实表达状况和安全性进行评价的模式。以柞蚕蛹免疫血淋巴作为标准 ,对照检测转抗菌肽辣椒目的蛋白表达的忠实性 ,采用针对转基因食品技术特点而预先设计的技术路线进行分析检测。研究和检测步骤为 :目的蛋白经粗提 ,达到初步纯化。再用两次CM Sepharose FF离子交换柱层析进行中度纯化。纯化产物通过测定抗菌活性、电泳及生物自显影、质谱进行鉴定。系统的检测结果表明 ,以抗菌肽目的基因构建的重组体在导入辣椒后 ,所表达的外源目的蛋白与对照标准蛋白的理化性质、抗菌活性、分子量一致 ,说明在该转基因辣椒中抗菌肽目的基因的表达是忠实的 ,与期望值相符。本研究建立了目的蛋白抗菌肽D的分离纯化及鉴定技术 ,建立了转基因辣椒外源目的蛋白的鉴定方法。

摘要：为了制备出安全、抗菌性能优的生物膜,文章以桑蚕丝胶、柞蚕丝素和明胶为生物基材,聚乙二醇200作为交联剂,制备桑蚕丝胶/柞蚕丝素/明胶基(BS-TSF-GEL)共混膜。通过设计单因素试验和正交试验优化BS-TSF-GEL共混膜的制备工艺,对膜的结构与性能进行表征,并利用吸附的方式载入抗菌肽,获得抗菌生物膜。研究结果表明,BS-TSF-GEL共混膜优化后的配方为体积比2︰1的桑蚕丝胶(4.50μg/mL)/柞蚕丝素(27.5 mg/mL)混合液,聚乙二醇200和明胶溶液(360 mg/mL),它们在总体系中占比分别为35%、40%和25%。所制备的BS-TSF-GEL共混膜溶失率为34.62%,断裂伸长率为34.15%,断裂强度为578.8 kPa。傅里叶红外光谱及X-射线衍射结果表明,BS-TSF-GEL共混膜以SilkⅡ为主,并伴有少量的SilkⅠ结构;BS-TSF-GEL共混膜呈淡黄色,表面含有微孔,负载抗菌肽的共混膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有良好的抑制作用,有望在伤口敷料等一次性使用的生物医用材料领域得到应用。

摘要：应用现代生物技术,从核酸和蛋白质水平对转柞蚕抗菌肽D基因辣椒第4代的目的基因进行了检测。发现所分离的柞蚕抗菌肽D基因与原设计的序列一样;辣椒组织中也含有抑菌物质,经与天然抗菌肽D对比,表明抗菌肽D基因得到了表达。

摘要：家蚕幼虫的翅原基最终发育为成虫的翅,翅原基发育与家蚕的变态发育紧密关联。为了研究激素作用下家蚕翅原基发育的分子调控机制,以经过蜕皮激素20E体外诱导培养和未经诱导培养的家蚕5龄幼虫翅原基为材料分别提取总蛋白质,利用Shotgun质谱分析在20E诱导组的翅原基中获得132种差异蛋白,在未经20E诱导组的翅原基中获得76种差异蛋白。进一步通过生物信息学技术及GO分类法在20E诱导组的翅原基的差异蛋白中,筛选到1个具有生物调节作用的酶类蛋白基因Bm HMGS作为翅原基发育相关的候选基因,设计引物并以上蔟1 d的蚕体翅原基总RNA反转录得到的c DNA为模板,克隆了该基因。通过qRT-PCR检测到Bm HMGS基因在幼虫5龄1 d、上蔟3 d、蛹期1 d蚕体内的表达量较高,其中在上蔟3 d的表达量达到峰值。构建重组载体进行Bm HMGS的原核表达并制备抗体后,采用Western blot技术在5龄1～7 d和上蔟1～3 d的蚕体翅原基、脂肪体中及上蔟1～3 d的生殖腺中都可以检测到Bm HMGS的表达,并且在翅原基中的表达没有发育时期特异性。研究结果表明,从20E诱导组的家蚕翅原基中鉴定的Bm HMGS与翅原基发育相关,其表达在5龄至上蔟阶段没有时期和组织的特异性,推测Bm HMGS是一个具有多种生物学功能的基因。

摘要：根据已知的抗菌肽moricin核苷酸和氨基酸序列设计兼并引物,利用PCR方法克隆得到柞蚕新型抗菌肽moricin.该序列长度为126bp,将该序列克隆到pUCm-T载体.通过测序鉴定了柞蚕moricin的核苷酸序列,其核苷酸序列与家蚕moricin II的相似性为99.21%.根据核苷酸序列推算的柞蚕氨基酸序列与家蚕moricin II和mori-cin I的相似性分别为97.62%和95.24%.无论柞蚕moricin的核苷酸还是氨基酸序列都与家蚕moricin相似,说明它们属于同一抗菌肽家族,柞蚕核苷酸序列已在美国国立生物技术信息中心登录,登录号为DQ519400.

摘要：桑叶尤其是桑嫩芽中富含γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA),为开发利用桑叶GABA,采用超声-微波协同萃取法提取桑叶GABA。通过单因素和Box-Behnken试验,探究提取时间、料液比、提取温度、超声波功率和微波功率对桑叶GABA提取量的影响。结果表明,提取时间、料液比及提取温度对桑叶GABA的提取影响较大,超声-微波协同萃取法提取的最佳技术参数为料液比1∶34、微波功率为144 W、超声波功率为50 W、提取时间为165 s,在此工艺条件下GABA提取量为5.83 mg/g。可见,采用超声-微波协同萃取法提取桑叶GABA具有提取率高、提取时间短等优点。

摘要：毕业论文是高等学校本科教学计划的重要组成部分,对培养大学生的科学素质起着重要作用。该文分析了对毕业论文产生负面影响的因素,从如何端正态度、做好毕业论文的选题、实验设计、实施和撰写等几个方面概述了指导本科毕业论文的一些思考、做法及体会。