摘要：目的 研制一项检测严重急性呼吸综合征的即时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,用于患者全血的检查。方法 内引物和短柄圆环探针(分子信标,molecular beacon)的设计,针对基因库SARS相关冠状病毒的高度保守区(RNA聚合酶基因区),在15 301和15 480之间(G130027616)。结果 即时RT-PCR荧光测量结果能显示SARS相关冠状病毒特有序列的扩增程度。常规PCR的145bp产物经测序证实与探针杂交的靶序列一致。结论 这一方法的建立对SARS临床诊断和病原研究提供一种快捷和准确的手段。

摘要：目的研究并建立荧光探针聚合酶链反应(PCR)技术,用于金黄色葡萄球菌(SAU)及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床检测。方法采用标准化荧光探针PCR技术及操作流程,进行灵敏性及特异性的鉴定。结果分析性灵敏性达到1×102拷贝/reaction,达到设计要求,具备高重复性;对1196例临床标本应用荧光探针PCR检测SAU,临床灵敏性为97.41%,临床特异性为98.47%,对527例SAU的临床样本进行MRSA筛查,临床灵敏性为99.74%,临床特异性为95.59%;对385份鼻腔拭子标本应用荧光探针PCR检测SAU,检出率达18.18%;对其中40株SAU进行MRSA筛查,检出率达42.50%。结论荧光探针PCR技术检测SAU及其MRSA的方法具有较高的优越性,适合在临床检测应用。